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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 关于Q Sepharose® Fast Flow 阴离子交换柱挂柱问题
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grape114

金虫 (正式写手)

Biosimilars

[求助] 关于Q Sepharose® Fast Flow 阴离子交换柱挂柱问题

我现在也用QFF分离蛋白，用的0.02m的NaOH和甘氨酸做缓冲液，调成PH10.0但是我的蛋白挂不上柱子，我蛋白的PI是8.6左右，想提高缓冲液的PH值，但是怕太高我的蛋白变性，想问下PH值最高能调成多少呢。谢谢
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笑对人生，相信自己。
1楼 2011-12-15 12:24:16
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2012yanzi

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
8楼: Originally posted by 豆豆菜虫 at 2012-11-03 20:33:02
那要是纯化多糖呢  用怎样的缓冲液？？？...

可以用磷酸二氢钾-磷酸氢二钠PH6.3缓冲液，用氯化钠做洗脱剂，但是如果分子量太大的的多糖，QFF柱居然不能保留，不知这个问题怎么解决？
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9楼2013-07-14 22:44:03
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lhhluo

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
你蛋白的PI在8.6，其实你把pH调到6或7，用阳离子柱去纯化更合适，如果一定要用Q柱的话，那调节pH低于你的PI让你的蛋白流穿会好点
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2楼2011-12-15 13:03:31
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lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
感觉你还是用阳离子交换吧，蛋白这个东西对PH还是要求比较苛刻的
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3楼2011-12-15 15:09:01
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grape114

金虫 (正式写手)

Biosimilars
引用回帖:
2楼: Originally posted by lhhluo at 2011-12-15 13:03:31:
你蛋白的PI在8.6，其实你把pH调到6或7，用阳离子柱去纯化更合适，如果一定要用Q柱的话，那调节pH低于你的PI让你的蛋白流穿会好点

我其实是sp柱下来的，分不开，所以有跑的Q柱，但是挂不上柱子，想看看最大能调成多少好点，能挂上，又不影响我的蛋白
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笑对人生，相信自己。
4楼2011-12-15 16:29:12
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