24小时热门版块排行榜    

查看: 4287  |  回复: 8
本帖产生 1 个 BioEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

grape114

金虫 (正式写手)

Biosimilars

[求助] 关于Q Sepharose® Fast Flow 阴离子交换柱挂柱问题

我现在也用QFF分离蛋白,用的0.02m的NaOH和甘氨酸做缓冲液,调成PH10.0但是我的蛋白挂不上柱子,我蛋白的PI是8.6左右,想提高缓冲液的PH值,但是怕太高我的蛋白变性,想问下PH值最高能调成多少呢。谢谢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

笑对人生,相信自己。
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

grape114

金虫 (正式写手)

Biosimilars

引用回帖:
2楼: Originally posted by lhhluo at 2011-12-15 13:03:31:
你蛋白的PI在8.6,其实你把pH调到6或7,用阳离子柱去纯化更合适,如果一定要用Q柱的话,那调节pH低于你的PI让你的蛋白流穿会好点

我其实是sp柱下来的,分不开,所以有跑的Q柱,但是挂不上柱子,想看看最大能调成多少好点,能挂上,又不影响我的蛋白
笑对人生,相信自己。
4楼2011-12-15 16:29:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 9 个回答

lhhluo

木虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你蛋白的PI在8.6,其实你把pH调到6或7,用阳离子柱去纯化更合适,如果一定要用Q柱的话,那调节pH低于你的PI让你的蛋白流穿会好点
2楼2011-12-15 13:03:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuan0525

金虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
感觉你还是用阳离子交换吧,蛋白这个东西对PH还是要求比较苛刻的
3楼2011-12-15 15:09:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lpw106

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
amisking(金币+4, BioEPI+1): 鼓励积极应助! 2011-12-15 20:01:57
两种选择:
1、继续用你的QFF,换buffer,如10mM的磷酸,pH7.0,收集穿透峰,同样可以达到除杂的目的,内毒素、DNA、HCP等杂质吸附到Q柱上,而目的蛋白穿透,纯化结束后CIP清洗即可将柱子还原到使用前的状态;
2、用SP阳离子柱,buffer pH7.0,目的蛋白吸附到柱子上,杂质穿透,增加盐浓度洗脱目的蛋白即可。
5楼2011-12-15 16:30:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 6/300 2026-09-06 17:21 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 9/450 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 17:09 by eObJPa4gWmp6
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 13:09 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 3/150 2026-09-06 12:49 by eObJPa4gWmp6
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 j5mmowWXNWxv 2026-09-05 4/200 2026-09-06 12:29 by eObJPa4gWmp6
[找工作] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 7/350 2026-09-06 11:40 by eObJPa4gWmp6
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +10 瞬息宇宙 2026-09-01 19/950 2026-09-06 11:15 by jiangxuan2004
[论文投稿] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-04 8/400 2026-09-06 11:00 by eObJPa4gWmp6
[考研] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 4/200 2026-09-06 07:20 by E1iiBLMU2XnD
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:39 by E1iiBLMU2XnD
[论文投稿] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 jPDp0sc2B7zQ 2026-09-05 5/250 2026-09-06 02:19 by E1iiBLMU2XnD
[基金申请] 面上没中,邀请各位路过的虫友分析一下分数 +12 jackleilei 2026-09-03 13/650 2026-09-05 18:10 by fireguard
[文学芳草园] 两块石头 +6 阿美_Lml888 2026-09-03 8/400 2026-09-05 13:52 by 阿美_Lml888
[文学芳草园] 初秋的晨风 +4 阿美_Lml888 2026-09-04 6/300 2026-09-05 13:51 by 阿美_Lml888
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +6 瞬息宇宙 2026-08-31 9/450 2026-09-05 13:11 by haizai99
[硕博家园] Ei源刊怎么投 +4 Fengshun9711 2026-09-04 4/200 2026-09-04 19:30 by 研途知予
[硕博家园] 哈尔滨工业大学韩晓军教授课题组招收2027年硕士推免生及博士研究生 +3 灯灯灯灯DDDD 2026-09-03 3/150 2026-09-03 21:22 by 科研皮皮猪
[基金申请] 要骂人了,新模版改版就是要淡化问题凝练这种虚的东西,结果有个评委还在说凝练得不够 +9 瞬息宇宙 2026-08-31 17/850 2026-09-02 14:04 by anjeeshine
信息提示
请填处理意见