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yuezhixian

铜虫 (初入文坛)

[求助] 小片段DNA电泳看不见条带

PCR产物酶切后目的片段长度分别为121BP,98BP和23BP,用3%琼脂糖凝胶电泳30min,电压150V,仅可见121bp和98bp两条带,连MARKER中长度为26bp的条带都没有看见,如果不跑30min,MARKER条带又跑不开。请问各位大侠,这要如何调整才可以跑出小片段DNA?
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扎实做好每一步,不急不躁!
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shine372

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
marker条带也没有看见的话,可以试试加大胶浓度,同时减小电压120-130V,缩短电泳时间20-25min,加大上样量
9楼2011-12-15 21:35:14
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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): Good! 2011-12-15 23:36:27
可以用PAGE胶分离。特别小的DNA用agrose胶分离效果本来就差,时间短了分不开,时间长了又扩散不见了。
2楼2011-12-14 20:42:46
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yuezhixian

铜虫 (初入文坛)

引用回帖:
: Originally posted by lxj341401 at 2011-12-14 20:42:46:
可以用PAGE胶分离。特别小的DNA用agrose胶分离效果本来就差,时间短了分不开,时间长了又扩散不见了。

需要加SDS吗?
扎实做好每一步,不急不躁!
3楼2011-12-14 20:56:05
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wcx蜗牛

无虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
西瓜(金币+1): 有可能 2011-12-15 23:37:06
是不是时间长了MARKER中长度为26bp的跑出去了,小分子用sds-PAGE胶分离胶试试
4楼2011-12-14 22:37:34
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