24小时热门版块排行榜    

查看: 965  |  回复: 14
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

[交流] 双酶切 已有1人参与

请大家指点:基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢,上样量是10微升,是因为切完之后浓度太小了吗?还是别的什么原因,在做AFLP,酶切连接之后电泳都没有明显结果,但是做选扩增PCR结果弥散分布在100-1000bp之间,求指点 谢谢各位了
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+3, MolEPI+1): 鼓励积极应助! 2011-12-06 20:05:34
楼主,我们当时做Southern blot时验证酶切是否完全是这样来的:DNA 浓度20-25ng/ul,酶切过夜后,取6-8ul加上loading buffer,0.8%胶,100V左右跑电泳验证。
jiayoubashaonian
4楼2011-12-06 17:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-12-06 14:54:50
基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢?很有可能是楼主的上样量太少!
jiayoubashaonian
2楼2011-12-06 13:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-12-06 13:44:14:
基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢?很有可能是楼主的上样量太少!

谢谢回复 我用的是20微升的双酶切体系 DNA加的300ng左右,点样点了10微升 依您看 该点多少呢  求指导 不胜感激
3楼2011-12-06 16:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-12-06 17:11:38:
楼主,我们当时做Southern blot时验证酶切是否完全是这样来的:DNA 浓度20-25ng/ul,酶切过夜后,取6-8ul加上loading buffer,0.8%胶,100V左右跑电泳验证。

哦 那您当时加得几微的DNA做的酶切 用的多大的体系呢,非常感谢了
5楼2011-12-06 19:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 rFEsUBKXRll0 2026-09-02 6/300 2026-09-03 16:49 by T0rGB46095mJ
[找工作] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 16:38 by T0rGB46095mJ
[硕博家园] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 5/250 2026-09-03 16:38 by T0rGB46095mJ
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 10/500 2026-09-03 16:27 by T0rGB46095mJ
[硕博家园] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 6/300 2026-09-03 15:23 by T0rGB46095mJ
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 9/450 2026-09-03 15:21 by T0rGB46095mJ
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 8/400 2026-09-03 14:48 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 国社科又开始会评了,不知道这次命运如何 +10 雨打竹帘 2026-08-30 14/700 2026-09-03 13:17 by qsd10086
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 YLHlRHNwYkce 2026-09-02 8/400 2026-09-03 12:03 by T0rGB46095mJ
[基金申请] 麻烦专家们看看评委们的意见(F口面上) +8 gdd2018 2026-08-28 13/650 2026-09-03 06:22 by 羽毛枫f
[公派出国] 售SCI-T0P文章,我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ero8OE6tv9cu 2026-09-02 4/200 2026-09-03 03:14 by rM1TE0WVDIIY
[基金申请] 科研人应该花精力去思考如何解决问题,而不是去凝练问题 +7 瞬息宇宙 2026-09-01 14/700 2026-09-02 17:33 by ma0526
[基金申请] 基金系统什么内容也没有 30+4 winsaint 2026-08-27 10/500 2026-09-02 11:35 by 大不刘6
[基金申请] 学科评审组评审是指会评吗? +5 瞬息宇宙 2026-08-31 5/250 2026-09-02 10:13 by 雨冰共舞
[基金申请] 面上函评意见出来了,像什么等级? 20+4 Tsingking1 2026-08-27 17/850 2026-09-01 19:51 by 超级无敌华子
[基金申请] 能否申诉? +7 echo8914667 2026-08-30 8/400 2026-08-31 17:00 by yihongxu
[基金申请] 中青基了要发朋友圈吗? +7 349506619 2026-08-28 7/350 2026-08-31 13:39 by 冼亮淀粉酶
[基金申请] 29号明天会评吗 +4 笨笨唐 2026-08-28 4/200 2026-08-31 09:30 by huixian257
[考博] 找导师 +6 yuanjiabao 2026-08-29 7/350 2026-08-30 14:40 by 生科新手
[基金申请] 国自然评审意见 +13 wangmingqi 2026-08-28 19/950 2026-08-29 10:22 by Poppy1104
信息提示
请填处理意见