24小时热门版块排行榜    

查看: 898  |  回复: 14
本帖产生 1 个 MolEPI ,点击这里进行查看
当前只显示满足指定条件的回帖,点击这里查看本话题的所有回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

[交流] 双酶切 已有1人参与

请大家指点:基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢,上样量是10微升,是因为切完之后浓度太小了吗?还是别的什么原因,在做AFLP,酶切连接之后电泳都没有明显结果,但是做选扩增PCR结果弥散分布在100-1000bp之间,求指点 谢谢各位了
回复此楼
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-12-06 17:11:38:
楼主,我们当时做Southern blot时验证酶切是否完全是这样来的:DNA 浓度20-25ng/ul,酶切过夜后,取6-8ul加上loading buffer,0.8%胶,100V左右跑电泳验证。

哦 那您当时加得几微的DNA做的酶切 用的多大的体系呢,非常感谢了
5楼2011-12-06 19:04:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 15 个回答

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-12-06 14:54:50
基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢?很有可能是楼主的上样量太少!
jiayoubashaonian
2楼2011-12-06 13:44:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

wskxbxf

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by blackrose8089 at 2011-12-06 13:44:14:
基因组DNA双酶切之后,为什么跑电泳什么都看不出来呢?很有可能是楼主的上样量太少!

谢谢回复 我用的是20微升的双酶切体系 DNA加的300ng左右,点样点了10微升 依您看 该点多少呢  求指导 不胜感激
3楼2011-12-06 16:12:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

blackrose8089

铁杆木虫 (职业作家)

★ ★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
amisking(金币+3, MolEPI+1): 鼓励积极应助! 2011-12-06 20:05:34
楼主,我们当时做Southern blot时验证酶切是否完全是这样来的:DNA 浓度20-25ng/ul,酶切过夜后,取6-8ul加上loading buffer,0.8%胶,100V左右跑电泳验证。
jiayoubashaonian
4楼2011-12-06 17:11:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通表情 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 是这周出结果还是下周出结果? +3 yuleib84 2026-08-11 3/150 2026-08-11 21:53 by jnhyjjm
[基金申请] 小木虫上这么多卖论文的,真有人买论文么?感觉没必要啊 +8 Tide man 2026-08-10 9/450 2026-08-11 20:39 by beefly
[基金申请] 有时候,自然基金真的不能太认真 (我的申报经验) +3 majunge000 2026-08-11 4/200 2026-08-11 20:13 by lch2012
[硕博家园] 读博的好处 +3 lnee 2026-08-11 3/150 2026-08-11 18:10 by 希望我好好的
[论文投稿] 职称评审,求友友推荐见刊最快的期刊 +3 工厂打螺丝 2026-08-08 3/150 2026-08-11 13:42 by 会议编辑
[基金申请] FileCode能看出啥? +7 要乐观耀哥 2026-08-10 17/850 2026-08-11 10:50 by 要乐观耀哥
[基金申请] 关于代码变化问题,想知道的进来 +17 且听虎啸 2026-08-07 24/1200 2026-08-10 18:35 by zhangduo2008
[基金申请] 静等基金结果 +5 gjjjzhong 2026-08-10 16/800 2026-08-10 17:19 by Tide man
[基金申请] 国自然结果 +4 Vierhys 2026-08-10 8/400 2026-08-10 15:06 by Vierhys
[基金申请] 好奇怪的filecode +4 布布和一二 2026-08-08 5/250 2026-08-10 14:20 by 冰心玉壶晴
[基金申请] 面上项目filecode邪修 +5 西山十月 2026-08-09 7/350 2026-08-10 07:32 by 仁砚薪传
[基金申请] fileCode有新解读? +10 Tide man 2026-08-08 18/900 2026-08-09 12:55 by 仁砚薪传
[基金申请] 关于filecode,很负责任的告诉大家 +6 爱看书的可乐 2026-08-08 7/350 2026-08-08 22:13 by a_niu
[基金申请] 国基金的申报应该改成非等额制,评价高的钱多评价低的钱少,但是增加资助率 +7 a089 2026-08-07 7/350 2026-08-08 18:05 by gltch
[基金申请] 关于filecode +4 布布和一二 2026-08-07 7/350 2026-08-07 22:55 by zhanghaozhu
[基金申请] 化学口download_prp&fileCode的固定段好像这几天一直没变,有变的大神么? +3 Tide man 2026-08-07 4/200 2026-08-07 22:39 by Tide man
[基金申请] 固定端突然变了,今天 +6 archvillain 2026-08-06 10/500 2026-08-07 16:03 by 医学老男孩
[基金申请] filecode +14 等待解的谜 2026-08-06 19/950 2026-08-07 12:20 by wlwhappy
[基金申请] 求各位大神看下 100+6 hpkpkpkp 2026-08-05 33/1650 2026-08-06 14:49 by zhiyanjiang
[基金申请] 好消息?这个有何含义??? +8 Tide man 2026-08-05 10/500 2026-08-05 16:14 by xmuxiaoyu
信息提示
请填处理意见