应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 3'RACE做了几次，为什么老是这样子，大家看一下帮帮忙吧，苦闷死了！~
21/1返回列表
查看: 2360  |  回复: 10
查看全部回帖 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

songxiaobop

金虫 (小有名气)

[求助] 3'RACE做了几次，为什么老是这样子，大家看一下帮帮忙吧，苦闷死了！~

用的是TAKARA的盒子
这个是做巢式PCR的第一轮扩增，似乎是又一条带，然后就按照说明书的要求，取1微升做了第二轮扩增，结果是这个样子。

然后几次做的都是下边这样的：

反转录体系中要求RNA的量是1微克，可是我感觉自己提的RNA浓度比较低，反转录体系是10微升的，怎样保证反转录的效果，怎样检测？
巢式扩增是不是按照说明书上的50微升体系比较好？
这样的结果应该怎样调整一下体系？
快毕业了，很是着急苦闷啊 。
求大家帮帮忙！










[ 来自科研家族 深海家族 ]
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-12-06 09:13:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

忘忧草_

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

songxiaobop(金币+3): 2011-12-19 08:43:10
个人感觉，在模板没问题的前提下，退火温度比较关键，比一般的pcr要稍高，第二次pcr适当增加循环数。
赞一下 回复此楼
不将就
10楼2011-12-08 22:22:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 songxiaobop 的主题更新
21/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭