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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 请教大家关于蛋白变性的问题
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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 请教大家关于蛋白变性的问题

我想问下  提取蛋白后  蛋白溶液   高速（12000）低温（4°）离心，这样蛋白会变性吗， 这样算是剧烈振荡导致变性吗？变性的话，有的蛋白是不是就失去生物活性了？
谢谢大家！
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1楼2011-12-05 21:48:59
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starseacow

专家顾问 (职业作家)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 感谢参与 2011-12-06 12:11:49
菠萝蜜123: 回帖置顶 2011-12-06 14:45:41
菠萝蜜123(金币+3): 谢谢给我肯定答复！ 2011-12-06 14:46:10
12000rpm低温离心不会使蛋白变性。在检测植物组织各种抗氧化酶活性，提取过程中一般会经过这样的离心处理，没见有报道会影响酶活性。
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植物生理群69993869，为避免广告，申请加入请提供木虫昵称，院校及专业信息
2楼2011-12-05 23:14:17
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xhjggl

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
lstt09nk(金币+1): 鼓励交流 2011-12-06 12:12:03
菠萝蜜123(金币+3): 谢谢！ 2011-12-06 14:46:26
不会的，一般导致变性的原因大致为，提取液的成分，保存条件，缓冲体系的，可以使用一步法植物活性蛋白提取试剂盒 BSP004
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3楼2011-12-06 11:27:29
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lihuan0525

金虫 (职业作家)
如果变性的话，蛋白肯定要失去活性了
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4楼2011-12-07 08:30:08
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
蛋白离心不会变性的，我们一般都是20000G离心30min的，引起蛋白变性的因素大多是盐离子的影响，或者温度，有机溶剂之类的
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
5楼2011-12-07 16:13:40
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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by jinpeng_6118 at 2011-12-07 16:13:40:
蛋白离心不会变性的，我们一般都是20000G离心30min的，引起蛋白变性的因素大多是盐离子的影响，或者温度，有机溶剂之类的

嗯 那用什么方法可以看出蛋白溶液到底有没有变性呢，我制备好新鲜的蛋白样品溶液  放入-80°的冰箱里，过两天测其酶活性可以吗
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6楼2011-12-08 21:24:26
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 菠萝蜜123 at 2011-12-08 21:24:26:
嗯 那用什么方法可以看出蛋白溶液到底有没有变性呢，我制备好新鲜的蛋白样品溶液  放入-80°的冰箱里，过两天测其酶活性可以吗

蛋白变性有的就直接析出沉淀，有的虽没沉淀，但也活性降低或没活性了。一般来说你这样可以放-80的，冻融一次应该没问题的。但不要反复冻融。如果甘油对你的测活性没多大的影响，你可以加10%的甘油作保护剂，对酶的保护比较好的。
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人生百态原为海，看破红尘方为岸！
7楼2011-12-09 22:58:55
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