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菠萝蜜123

新虫 (小有名气)

[求助] 请教大家关于蛋白变性的问题

我想问下  提取蛋白后  蛋白溶液   高速(12000)低温(4°)离心,这样蛋白会变性吗, 这样算是剧烈振荡导致变性吗?变性的话,有的蛋白是不是就失去生物活性了?
谢谢大家!
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

蛋白离心不会变性的,我们一般都是20000G离心30min的,引起蛋白变性的因素大多是盐离子的影响,或者温度,有机溶剂之类的
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
5楼2011-12-07 16:13:40
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jinpeng_6118

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 菠萝蜜123 at 2011-12-08 21:24:26:
嗯 那用什么方法可以看出蛋白溶液到底有没有变性呢,我制备好新鲜的蛋白样品溶液  放入-80°的冰箱里,过两天测其酶活性可以吗

蛋白变性有的就直接析出沉淀,有的虽没沉淀,但也活性降低或没活性了。一般来说你这样可以放-80的,冻融一次应该没问题的。但不要反复冻融。如果甘油对你的测活性没多大的影响,你可以加10%的甘油作保护剂,对酶的保护比较好的。
人生百态原为海,看破红尘方为岸!
7楼2011-12-09 22:58:55
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