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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)

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[求助] 发酵罐染菌问题

现在在做一项目，一上罐子就染菌，摇瓶一点问题都没有。5L，7L，30L都试过，每个罐子都染。由于培养基灭菌不透彻，里面最有可能的就是5%的黄豆饼粉(其他的都单独试过，没有问题)，想请各位大侠帮帮忙，这种问题怎么解决啊？~~~急~~~急
另，
1）已试过将黄豆饼粉单独在灭菌前煮沸1-2h，发酵后期仍有染菌现象；
2）黄豆饼粉水解后过滤，可解决，但是菌种生长受到限制。
不知各位是否有更好的办法解决？

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erbaomama

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1楼 2011-11-29 12:37:47

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thiophene9859

金虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★
cheauyn(金币+2): 谢谢！ 2011-11-30 10:17:58
zhang8826857(金币+1): 写了这么多，奖励热心虫子 2011-11-30 11:15:47

一般来说黄豆粉不存在灭菌不透的问题，如果怀疑黄豆粉，摇瓶实验有没有添加黄豆粉？摇瓶实验要是添加了黄豆粉没有染，就说明不是黄豆粉的问题。检验摇瓶种子有没有染菌显微镜检测在杂菌浓度低的时候不可靠，建议采用平板涂布。
如果种子没有问题，罐体密封性没有问题。做个设备验证，在发酵罐中随便加点葡萄糖、蛋白胨，灭菌后不接种，通气，如果还染菌就说明是空气系统的问题。如果空气系统有问题，空压机是否定期排水？油水分离器是否良好工作，都没有问题尝试更换空气过滤器，小罐过滤器便宜，几十块一个。