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cheauyn

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 发酵罐染菌问题

现在在做一项目,一上罐子就染菌,摇瓶一点问题都没有。5L,7L,30L都试过,每个罐子都染。由于培养基灭菌不透彻,里面最有可能的就是5%的黄豆饼粉(其他的都单独试过,没有问题),想请各位大侠帮帮忙,这种问题怎么解决啊?~~~急~~~急
      另,
    1) 已试过将黄豆饼粉单独在灭菌前煮沸1-2h,发酵后期仍有染菌现象;
    2)黄豆饼粉水解后过滤,可解决,但是菌种生长受到限制。
    不知各位是否有更好的办法解决?
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thiophene9859

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


cheauyn(金币+2): 谢谢! 2011-11-30 10:17:58
zhang8826857(金币+1): 写了这么多,奖励热心虫子 2011-11-30 11:15:47
一般来说黄豆粉不存在灭菌不透的问题,如果怀疑黄豆粉,摇瓶实验有没有添加黄豆粉?摇瓶实验要是添加了黄豆粉没有染,就说明不是黄豆粉的问题。检验摇瓶种子有没有染菌显微镜检测在杂菌浓度低的时候不可靠,建议采用平板涂布。
如果种子没有问题,罐体密封性没有问题。做个设备验证,在发酵罐中随便加点葡萄糖、蛋白胨,灭菌后不接种,通气,如果还染菌就说明是空气系统的问题。如果空气系统有问题,空压机是否定期排水?油水分离器是否良好工作,都没有问题尝试更换空气过滤器,小罐过滤器便宜,几十块一个。
7楼2011-11-30 09:10:16
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donng

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

cheauyn(金币+2): 谢谢!其实这也试过,不过效果不是很理想,而且考虑到以后如果放大生产,这也不是个长久之计。现在灭菌都已经温度更高了,时间基本都是在30min以上之45min,可仍旧存在染菌问题,头大了~~~ 2011-11-29 14:45:57
将黄豆饼粉单独灭菌,发酵前和种子一起加进去。罐按照121度,20min灭菌,也可以在灭罐之前给发酵罐空灭一次,温度可以高一点,时间长一点。
2楼2011-11-29 14:40:11
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kissyls

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

cheauyn(金币+1): 发酵前,发酵中都会有染菌现象 2011-11-30 08:33:40
染菌,问下是发酵前染菌,还是说发酵中期染菌?这个很重要
我像只鱼儿在你的荷塘,只为和你守候那皎白月光.游过了四季荷花依然香,等你宛在水中央.
3楼2011-11-29 22:41:24
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yujiuxi

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

cheauyn(金币+1): 这是必然的,可是不能每个罐子都染菌啊? 2011-11-30 08:37:49
给罐体通无菌空气,让罐体处于正压状态GG
赚钱娶媳妇
4楼2011-11-30 07:05:00
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