24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

Marado

金虫 (正式写手)

Dreamer

应助: 81 (初中生)
金币: 1458.8
散金: 100
红花: 1
帖子: 430
在线: 196.7小时
虫号: 1512351
注册: 2011-11-27
专业: 生物化学

[求助] 液相新手请大家分析一下这个样品图~谢谢了！

本人是一名液相新手，最近才开始学习使用HPLC，之前实验室都是用液相简单的跑一下乙醇，糖类，而我这次需要测的东西是NADH，中文全名为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸，即常说的还原型辅酶Ⅰ，查阅了许多文献，根据其中的一篇文献资料进行重复试验.
该文献的色谱分析条件为：
柱条件：Agilent1200series，columnstable-C18（250minx4．6mm)柱。
梯度洗脱条件：0min100％bufferA；10min50％bufferA；11min100％bufferA；15min100％bufferA。
流速1．0mL／min，
检测波长：254nm，340nm。
柱温：35℃。
bufferA

H7.0 PBS(磷酸钾缓冲液）

本人所用柱子为inertsil OS-SP(C18）（150minx4．6mm）柱
用标准样品跑了一张如图，大约9min的时候出峰……如图所示
之后提取了酵母胞内的NADH跑了几次，出现的峰非常诡异，从9min开始，基线都开始不稳了……求各位老师分析下，需要改进什么，新手虚心请教！谢谢！

图见附件！！

回复此楼

» 本帖附件资源列表

欢迎监督和反馈：小木虫仅提供交流平台，不对该内容负责。
本内容由用户自主发布，如果其内容涉及到知识产权问题，其责任在于用户本人，如对版权有异议，请联系邮箱：xiaomuchong@tal.com
附件 1 : NADH标准.bmp

2011-11-27 17:19:11, 949.55 K

附件 2 : 跑出来的图.bmp

2011-11-27 17:19:20, 951.05 K

» 猜你喜欢

职称评审没过，求安慰已经有49人回复
26申博自荐已经有3人回复
A期刊撤稿已经有4人回复
垃圾破二本职称评审标准已经有17人回复
投稿Elsevier的Neoplasia杂志，到最后选publishing options时页面空白，不能完成投稿已经有22人回复
EST投稿状态问题已经有7人回复
毕业后当辅导员了，天天各种学生超烦已经有4人回复
三无产品还有机会吗已经有6人回复

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

Look,ifyouhadoneshot,oroneopportunity,toseizeeverythingyoueverwanted,inonemoment.Wouldyoucaptureit,orjustletitslip?

1楼 2011-11-27 17:19:24

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

kaven186

银虫 (小有名气)

应助: 22 (小学生)
金币: 301.1
红花: 1
帖子: 108
在线: 83.9小时
虫号: 1484826
注册: 2011-11-09
性别: GG
专业: 化学反应工程

【答案】应助回帖

引用回帖:

4楼: Originally posted by Marado at 2011-11-28 16:10:35:
如果添加标准跑出了峰是不是说明我样品里面NADH含量过低，或者说根本没有提取出来呢？
我在想，是不是由于文献里面的柱子长度是250，而我的是150的原因？改变一下梯度时间是不是有用呢？

你可以换一根250的柱子，250的柱效快是150的两倍了可能更加有利于分离