| 查看: 1417 | 回复: 3 | ||
| 【悬赏金币】回答本帖问题，作者xiaoyang123将赠送您 3 个金币 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
xiaoyang123金虫 (小有名气)
|
[求助]
PCR后测序，blast最高匹配度只有32%
|
|
|
PCR后电泳跑出了特异性的单带，PCR产物再次用原引物PCR，提高产物浓度，测序。 以下是测序公司返回的结果： 引物 现象判别 可能原因 建议方案 引物1： 测序无信号 重新提供样品 引物2： 测序结果出现套峰 样品存在片段大小相近的非特异性扩增，而琼脂糖回收无法分离这样的片段所致 优化反应条件重新提供样品测序 根据测序公司给出的测序结果，在NCBI上比对，只有后200bp左右有匹配（产物840bp），且匹配度只有76%左右。 疑问1：常见菌的基因全序列在Genebank上是否都有登录呢，如果是这样的话，扩增出得任意一段序列，在测序结果没有问题的情况下，是否都能够比对出结果呀？ 疑问2：测序无信号，通常是什么原因导致的呢？ 疑问3：电泳显示出特异性的单带，而且用的是HS Taq，高特异性聚合酶，测序结果为何出现严重套峰？是否应解释为有两条长度相同，引物相同的片段呢？这个可能几率有多大呢？ 新手上路，总是遇到各种各样诡异的结果，还望各位不吝赐教。  |
回复此楼» 猜你喜欢
关于举办2024年化工制药与材料类优秀大学生暑期夏令营的通知
已经有0人回复
-
M9培养基浑浊
已经有1人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有71人回复
-
面上评审意见-帮忙看一下等级（没上会）
已经有81人回复
-
目的基因序列中有多个引物插入
已经有1人回复
-
链霉亲和素磁珠偶联biotin修饰分子好还是点击反应偶联分子好？
已经有0人回复
-
磁珠法纯化蛋白相比层析柱有什么优势？
已经有3人回复
-
磁固相萃取在药物分析中有潜在应用价值吗？
已经有0人回复
-
关于为什么要在生物传感形成图案的原因求助
已经有0人回复
-
华东理工大学化工学院胡静课题组招博士生和博士后。欢迎有志科研青年加入！
已经有0人回复
-
申博申博
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 为何PCR产物测序只测一部分？
已经有9人回复
- PCR产物经酶切电泳后所得的基因型与测序结果不一致，是何原因？该如何处理？
已经有10人回复
- PCR测序结果出来后怎样在NCBI上进行比对？求各位高手帮忙！
已经有12人回复
- 关于cDNA合成，PCR及其测序方面的小问题，小白求助……
已经有11人回复
- pcr产物测序问题
已经有10人回复
- pcr产物测序和克隆之后重组质粒测序结果一样吗？
已经有12人回复
- 细菌16s pcr原液测序问题
已经有7人回复
- 咨询PCR产物测序问题
已经有7人回复
- 【求助/交流】如何对PCR测序产物进行分析？
已经有11人回复
- 【求助/交流】PCR产物测序总是不对
已经有13人回复
- 【求助/交流】测序后发现pcr产物中碱基错配。原因？
已经有5人回复
- 【问题反馈】一对引物扩出来的产物测序后竟然是很多质粒的PCR产物，再怎么区分呢？
已经有10人回复
- 【求助/交流】PCR产物直接测序，不出峰，啥原因？
已经有11人回复
- 【求助/交流】请教PCR和基因测序的问题！！！
已经有24人回复
blackrose8089
铁杆木虫 (职业作家)
- MolEPI: 16
- 应助: 100 (初中生)
- 贵宾: 0.11
- 金币: 10603.6
- 散金: 155
- 红花: 30
- 沙发: 6
- 帖子: 3692
- 在线: 788.1小时
- 虫号: 614948
- 注册: 2008-09-28
- 专业: 植物学研究的新技术、新方
3楼2011-11-24 19:22:56
100