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新虫 (正式写手)

[求助] 蛋白纯化镍柱、分子筛

用tris-hcl ph8的缓冲液破菌、溶解蛋白

上镍柱时用tris-hcl ph8,200mM咪唑洗脱蛋白下来

问题:上分子筛的平衡缓冲液和洗脱缓冲液用什么?加不加咪唑呢?
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haoziying

至尊木虫 (职业作家)

以上各位说的都挺对的。
亲和柱和分子筛的分离原理是不一样的。过分子筛可以去掉过镍柱时的咪唑,对后续试验有帮助。
过分子筛建议你用最后你想保存的缓冲液,之后再用PBS或者TRIS-Hcl把筛子筛平衡了就行了。保存时加上防腐剂,或者乙醇。
6楼2011-11-21 22:34:58
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