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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » wb，条带异常，拖尾，弥散。
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lxy19870124

铁虫 (初入文坛)

[求助] wb，条带异常，拖尾，弥散。 已有2人参与

我崩溃了，做了很多次都是这样子的，不知道什么原因，上图！！！[img]

就这熊样



条带中空



背景很深，我是挑不深的上的



无语
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遇到问题，解决问题。
1楼 2011-11-17 15:24:26
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lxy19870124

铁虫 (初入文坛)
3楼2011-11-17 15:30:08
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lxy19870124

铁虫 (初入文坛)
附加说明：我用的是10％的胶，条带每次出来都跟彗星一样，最显著的是条带两边像流泪一样，很着急，大家给帮忙，在线等！！！！！！！！！！！
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遇到问题，解决问题。
2楼2011-11-17 15:26:53
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2011加油

银虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
wanhscn(金币+3): 鼓励应助！ 2011-11-18 19:31:00
条带中空，很大可能是在压片前，盖保鲜薄膜时有气泡引起的。注意把保鲜膜捋平。

条带拖尾确实很严重，是不是浓缩胶的长度不够，下回可试一试将浓缩胶的长度制得长一些，将蛋白更好地浓缩；或者根据你的蛋白分子量，看看选择的分离胶比例是否合适了，太稀时对蛋白可能有点弥散，所以选择分离胶的比例也很重要。背景较高，可以再适当调整一下一抗二抗的稀释度或者延长封闭时间、洗膜时间或增加洗膜次数，另外，曝光的时间可再缩短一些。祝你下回实验成功。
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每天都是新开始，2011，要好好努力！
4楼2011-11-17 19:18:55
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zengmud2

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流 2011-11-18 19:31:10
楼主可从以下方面考虑改进
1. 浓缩胶的长度不够
2. 分离胶浓度偏低
3. 跑胶电压过高
4. 检查转膜时有无带动凝胶和膜的相对位移因素
5. 显影时间过长
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5楼2011-11-17 21:11:24
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