| 查看: 1340 | 回复: 2 | |||
[交流]
有哪位高手western blotting做过MCF-7的cyclinB和cyclind1？ 已有2人参与
|
| 我现在在做WB，细胞系是MCF-7R,但是跑过一次之后发现没有曝出条带来。。。因为提取蛋白的时候加裂解液体积大了一点 所以上样量只有10ug, 另外我的抗体是santa cruz的抗人cyclin B和cyclinD1的抗体，1:500稀释的 我想问下有人做过相关实验吗？我不知道这俩蛋白的表达量 是不是蛋白上样量太少了引起的条带出不来？或者有谁用过这家的两个抗体，稀释比例一般是多少呢？ 感谢大家帮忙解决~ |
回复此楼» 猜你喜欢
含氟糖皮质激素的外用抗炎利器醋酸氟轻松
已经有0人回复
-
阿莫奈韦（Amenamevir）：解旋酶-引物酶靶向分子的结构特征与合成路径全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有149人回复
-
利瑞鲁单抗：靶向KIR的NK细胞检查点工具抗体，结构基础与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 哪位高手能帮忙解释一下这张DSC图谱？
已经有9人回复
- 求助western mark 转膜不全，急！
已经有7人回复
- 汉译英，330字，医学专业，请高手帮忙搞定，请手译，谢绝机翻，摆脱，谢谢！
已经有1人回复
- western blot 背景深浅问题，请大家指教下啊
已经有6人回复
- 关于硬脂酸皂化问题，请各位高手帮助
已经有14人回复
- 提膜受体蛋白做western，
已经有3人回复
- 求高手出山...这三个极性大小大概是个怎样的关系
已经有5人回复
- 免疫印迹技术服务(western blot)
已经有56人回复
- 问题请教-western blotting
已经有14人回复
- 【求助/交流】有关western blotting的求救
已经有9人回复
- western Blotting 的问题
已经有5人回复
2楼2011-11-21 16:30:31
★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 鼓励应助 2011-11-23 17:51:59
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖
wanhscn(金币+1): 鼓励应助 2011-11-23 17:51:59
|
我用过MCF-7，不过不是楼主做的蛋白~但是跟你遇到过同样的问题！santa和cell signaling technology的我都用了，明显cell signaling的好用...这样，你先确定二抗，是不是抗一抗来源的！我们这边有个小丫头就是做了好久，最后发现是二抗的问题...还有就是，我建议你用进口的显色剂，我曾经有3个月没做出条带，最后换了Pierce的显色剂，目的条带全出来了...说实话，楼主你的蛋白量确实太少了...我一般都要上60ug的... 一抗的稀释比例一般都是1：500-1:1000，应该不是楼主你稀释的问题~ |
3楼2011-11-23 15:58:43
