应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
81/1返回列表
查看: 3517  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

appletreelym

铜虫 (初入文坛)

[求助] Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？

本人最近做Taqman实时荧光定量PCR是常出现一个问题，本底信号非常高，如下图，是什么原因导致的呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-16 14:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): Good! 鼓励新虫友参加交流！ 2011-11-16 16:18:27
有些仪器是要加校正染料的，以便消除本地信号的干扰，是不是没加校正染料呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-16 16:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2011-11-16 18:10:54
看你的扩增曲线都在40个循环左右了，说明你的模板浓度过低，扩增信号当然也就低了，如果不是模板浓度过低的原因，就有可能是探针杂交效率低，这样就显得本底很高，你把扩增曲线弄成线性的看下
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-11-16 16:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-11-16 16:12:12:
有些仪器是要加校正染料的，以便消除本地信号的干扰，是不是没加校正染料呢？

我用的仪器是BIO-RAD CFX96 ，操作说明上没说要加校正染料。一般校正染料是自己买的还是仪器附带的？
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-17 10:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2011-11-16 16:58:56:
看你的扩增曲线都在40个循环左右了，说明你的模板浓度过低，扩增信号当然也就低了，如果不是模板浓度过低的原因，就有可能是探针杂交效率低，这样就显得本底很高，你把扩增曲线弄成线性的看下

这是线性图，麻烦您帮我看一下，谢谢！探针杂交效率低是什么原因呢？退火温度？
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-17 10:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


appletreelym(金币+3): 2011-11-17 10:56:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by appletreelym at 2011-11-17 10:47:42:
这是线性图，麻烦您帮我看一下，谢谢！探针杂交效率低是什么原因呢？退火温度？

看不到你的全景图，探针效率低，可能是和设计有关，多做几次，一两次实验说明不了问题
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

appletreelym
6楼2011-11-17 10:49:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by love_st at 2011-11-17 10:49:19:
看不到你的全景图，探针效率低，可能是和设计有关，多做几次，一两次实验说明不了问题

嗯，先自己摸索一下吧。谢谢！
赞一下 回复此楼
7楼2011-11-17 10:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

baseline扣除不对。自定义下baseline就好了。试一下baseline扣除从2到18个循环。
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-10 13:22:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 appletreelym 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 zSbvVX9JFl9J 2026-11-09 3/150 2026-11-10 01:40 by FChKX8meu1ds
[文学芳草园] 厉娜 +3 张丹枫1991 2026-11-09 5/250 2026-11-09 16:53 by 张丹枫1991
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 12/600 2026-11-09 13:26 by Equinoxhua
[考研] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 15/750 2026-11-09 13:19 by Equinoxhua
[考研] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +6 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 14/700 2026-11-09 11:52 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 16/800 2026-11-09 11:47 by GwrQVVR6Oenx
[考博] 售SCI文章，我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 15/750 2026-11-09 11:41 by GwrQVVR6Oenx
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 10/500 2026-11-09 08:00 by IhnEQauGmT3K
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 12/600 2026-11-09 06:32 by l48hFd8Nwae2
[公派出国] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +4 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 8/400 2026-11-09 00:14 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 5sJFDKp2kwuI 2026-11-06 9/450 2026-11-08 22:46 by l48hFd8Nwae2
[教师之家] 延安大学回应“副教授留绝笔信”：确已离世，正核实举报内容 +3 yexuqing 2026-11-04 5/250 2026-11-07 13:22 by 苏东坡二世
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 16:12 by 5sJFDKp2kwuI
[硕博家园] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 11/550 2026-11-06 16:10 by 5sJFDKp2kwuI
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +5 kvewwGtKktqB 2026-11-04 14/700 2026-11-06 05:10 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +6 kvewwGtKktqB 2026-11-04 16/800 2026-11-06 05:00 by qL1cU46YIdK0
[考博] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 7/350 2026-11-06 02:13 by qL1cU46YIdK0
[考研] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 10/500 2026-11-06 02:04 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 ttH3f1oA6ace 2026-11-04 9/450 2026-11-06 02:02 by qL1cU46YIdK0
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 hNpp4Y2CGvSC 2026-11-04 12/600 2026-11-06 01:53 by qL1cU46YIdK0
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭