应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
81/1返回列表
查看: 2970  |  回复: 7
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

appletreelym

铜虫 (初入文坛)

[求助] Taqman实时荧光定量PCR本地信号过强是什么原因？

本人最近做Taqman实时荧光定量PCR是常出现一个问题，本底信号非常高，如下图，是什么原因导致的呢？
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-11-16 14:34:41
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liweiwei0812

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
wanhscn(金币+2): Good! 鼓励新虫友参加交流！ 2011-11-16 16:18:27
有些仪器是要加校正染料的，以便消除本地信号的干扰，是不是没加校正染料呢？
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-11-16 16:12:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2): 鼓励积极应助！ 2011-11-16 18:10:54
看你的扩增曲线都在40个循环左右了，说明你的模板浓度过低，扩增信号当然也就低了，如果不是模板浓度过低的原因，就有可能是探针杂交效率低，这样就显得本底很高，你把扩增曲线弄成线性的看下
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-11-16 16:58:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by liweiwei0812 at 2011-11-16 16:12:12:
有些仪器是要加校正染料的，以便消除本地信号的干扰，是不是没加校正染料呢？

我用的仪器是BIO-RAD CFX96 ，操作说明上没说要加校正染料。一般校正染料是自己买的还是仪器附带的？
赞一下 回复此楼
4楼2011-11-17 10:40:01
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by love_st at 2011-11-16 16:58:56:
看你的扩增曲线都在40个循环左右了，说明你的模板浓度过低，扩增信号当然也就低了，如果不是模板浓度过低的原因，就有可能是探针杂交效率低，这样就显得本底很高，你把扩增曲线弄成线性的看下

这是线性图，麻烦您帮我看一下，谢谢！探针杂交效率低是什么原因呢？退火温度？
赞一下 回复此楼
5楼2011-11-17 10:47:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

love_st

金虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


appletreelym(金币+3): 2011-11-17 10:56:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by appletreelym at 2011-11-17 10:47:42:
这是线性图，麻烦您帮我看一下，谢谢！探针杂交效率低是什么原因呢？退火温度？

看不到你的全景图，探针效率低，可能是和设计有关，多做几次，一两次实验说明不了问题
赞一下 回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

appletreelym
6楼2011-11-17 10:49:19
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

appletreelym

铜虫 (初入文坛)
送鲜花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by love_st at 2011-11-17 10:49:19:
看不到你的全景图，探针效率低，可能是和设计有关，多做几次，一两次实验说明不了问题

嗯，先自己摸索一下吧。谢谢！
赞一下 回复此楼
7楼2011-11-17 10:55:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

六妖妖

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

baseline扣除不对。自定义下baseline就好了。试一下baseline扣除从2到18个循环。
赞一下 回复此楼
8楼2012-10-10 13:22:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 appletreelym 的主题更新
81/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿中海洋材料357 +3 麦恩莉. 2026-03-30 3/150 2026-03-30 21:01 by chixmc
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 0703化学求调剂 +6 丹青奶盖 2026-03-26 8/400 2026-03-30 18:33 by 探123
[考研] 材料专硕 085600求调剂 +7 BBQ233 2026-03-30 7/350 2026-03-30 17:44 by oooqiao
[考研] 322求调剂：一志愿湖南大学 材料与化工（085600），已过六级。 +9 XX小邓 2026-03-29 9/450 2026-03-30 17:18 by limeifeng
[考研] 300求调剂，材料科学英一数二 +18 leaflight 2026-03-24 18/900 2026-03-30 15:59 by wangjy2002
[考研] 317求调剂 +10 蛋黄咸肉粽 2026-03-26 10/500 2026-03-30 09:45 by longlotian
[考研] 340求调剂 +6 Amber00 2026-03-26 6/300 2026-03-29 12:06 by 无际的草原
[考研] 085602 化工专硕 338分 求调剂 +12 路痴小琪 2026-03-27 12/600 2026-03-28 15:41 by L135790
[考研] 一志愿南京航空航天大学材料学硕求调剂 +3 @taotao 2026-03-28 3/150 2026-03-28 10:26 by JourneyLucky
[考研] 352分 化工与材料 +5 海纳百川Ly 2026-03-27 5/250 2026-03-28 03:39 by fmesaito
[考博] 26申博 +3 加油冲啊！ 2026-03-26 3/150 2026-03-27 15:38 by cls512
[考研] 08开头275求调剂 +4 拉谁不重要 2026-03-26 4/200 2026-03-27 14:12 by Delta2012
[考研] 316求调剂 +5 Pigcasso 2026-03-24 5/250 2026-03-27 12:10 by zhshch
[考研] 考研调剂 +10 呼呼？~+123456 2026-03-24 10/500 2026-03-27 11:46 by wangjy2002
[考研] 334分 一志愿武理-080500 材料求调剂 +4 李李不服输 2026-03-25 4/200 2026-03-25 21:26 by 星空星月
[考研] 285求调剂 +3 AZMK 2026-03-24 3/150 2026-03-25 12:23 by userper
[考研] 300分，材料，求调剂，英一数二 +5 超赞的 2026-03-24 5/250 2026-03-24 21:07 by 星空星月
[考研] 085404电子信息284分求调剂 +4 13659058978 2026-03-24 4/200 2026-03-24 12:15 by syl20081243
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭