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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 用18T载体的通用引物进行筛选阳性菌液，跑出来的条带大小不对。。。
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461241086

新虫 (初入文坛)

[交流] 用18T载体的通用引物进行筛选阳性菌液，跑出来的条带大小不对。。。

我用的是18T载体的M13通用引物做的菌液pcr（共挑10个单克隆），目的片段是3kb,可电泳条带全部都是800~1000bp的，不知是为什么，求高人指点。
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1楼 2011-11-07 19:47:49
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hellolin

金虫 (小有名气)
★
461241086(金币+1):谢谢参与
连接没连好，3K是不是连接有点困难的。。
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5楼2011-11-08 14:53:46
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wjswj

木虫 (正式写手)
★
461241086(金币+1):谢谢参与
M13引物和你的片段上有结合位点，可以假引发？？
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2楼2011-11-08 10:16:55
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461241086

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by wjswj at 2011-11-08 10:16:55:
M13引物和你的片段上有结合位点，可以假引发？？

我检测了一下，没有非特异性结合
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3楼2011-11-08 11:51:21
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A406

新虫 (初入文坛)
★
461241086(金币+1):谢谢参与
延伸时间够不够？也有可能连的基因不是你的目的基因
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4楼2011-11-08 13:17:43
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