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kjxyzxh001

铜虫 (小有名气)

[求助] 携带转座子的质粒能做表达载体么?

各位大虾,我是做转座子的,插入的宿主是支原体,所以转座子比较小,最近看到一篇文章,其克隆方案如下:
(figure 1、2)




小弟十分迷茫,这个pMT85质粒转化到支原体基因组后,只能是两个IR序列之间的片段插入了支原体基因组,而克隆方案中MCS1位点插入的要表达的四个片段都在转座片段之外,是不能插入到支原体基因组的,应该是不能转录并表达的吧,但实验结果是检测到了片段的表达,这应该是pMT85自身的启动子造成片段的表达的吧?但这种携带转座子的质粒能作为表达载体吗,还是两个IR之外的片段(figure 3)也都插入了支原体基因组造成了表达,



请各位高手给予解答!小弟在此谢谢了!
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lmyclc

新虫 (小有名气)

我也是做转座子的、。只不过我是要转植物,想问问前辈在克隆转座子构建过表达载体的过程中有没有问题?据说它不表达?

发自小木虫IOS客户端
2楼2018-01-25 13:08:12
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