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kjxyzxh001铜虫 (小有名气)
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携带转座子的质粒能做表达载体么?
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各位大虾,我是做转座子的,插入的宿主是支原体,所以转座子比较小,最近看到一篇文章,其克隆方案如下: (figure 1、2) 小弟十分迷茫,这个pMT85质粒转化到支原体基因组后,只能是两个IR序列之间的片段插入了支原体基因组,而克隆方案中MCS1位点插入的要表达的四个片段都在转座片段之外,是不能插入到支原体基因组的,应该是不能转录并表达的吧,但实验结果是检测到了片段的表达,这应该是pMT85自身的启动子造成片段的表达的吧?但这种携带转座子的质粒能作为表达载体吗,还是两个IR之外的片段(figure 3)也都插入了支原体基因组造成了表达, 请各位高手给予解答!小弟在此谢谢了! |
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