[交流] 双酶切

1楼: Originally posted by junxiao0320 at 2011-10-19 19:48:03:
用双酶切一个质粒，一个是76bp，一个是3400bp，用1%的胶和2%的胶都跑拉一遍，只有一条带3400bp，是那条太小吗？

2楼: Originally posted by 天使托 at 2011-10-19 20:01:32:
76bp太小了吧，标记的marker不知道多大？
不要等电泳跑完再照相，不然基本看不到小的那条带。。。
可以等电泳跑上10分钟照一照，这样或许会看到。。。
不过我奇怪的是楼主为什么要看到那段76bp的条带呢？
对于 ...

13楼: Originally posted by junxiao0320 at 2011-10-20 09:25:38:
最小的marker标记是100bp，因为单酶切3476同双酶切效果相似，没有看到小的条带，所以不知道是否是单酶切还是双酶切。

6楼: Originally posted by 三目 at 2011-10-19 23:06:14:
你可以分两次单酶切看看结果，不过你这个3400的，跟质粒有点难分开啊

18楼: Originally posted by lz7233504 at 2011-10-20 14:06:21:
760bp一点不小  是lz没跑好吧 1%的胶足够了

15楼: Originally posted by peace12039088 at 2011-10-20 10:53:54:
如果不是回收的话，为什么非要看到76bp的带呢？76bp确实不够大，不易在胶上看到。如果你是想回收3kb多的片段再做下一步实验的话，那3kb多的片段上应该还有其它酶切位点吧，不知可否再选择其它合适的酶切位点来确定 ...

23楼: Originally posted by xiaoche at 2011-10-26 21:21:37:
你其实不用来证明吧？后期实验是用来连接的话，如果连接上，那说明是双酶切开了，其实双酶切很容易的。