应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 双酶切
51/1返回列表
查看: 2972  |  回复: 24
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

junxiao0320

金虫 (小有名气)

[交流] 双酶切

用双酶切一个质粒，一个是76bp，一个是3400bp，用1%的胶和2%的胶都跑拉一遍，只有一条带3400bp，是那条太小吗？
回复此楼

» 猜你喜欢
1楼 2011-10-19 19:48:03
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

friya0910

新虫 (正式写手)
★ ★
junxiao0320(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-22 15:31:29
引用回帖:
1楼: Originally posted by junxiao0320 at 2011-10-19 19:48:03:
用双酶切一个质粒，一个是76bp，一个是3400bp，用1%的胶和2%的胶都跑拉一遍，只有一条带3400bp，是那条太小吗？

把酶切质粒浓度提高看看。
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2011-10-19 20:37:31
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答

天使托

专家顾问 (职业作家)
★ ★ ★ ★
junxiao0320(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+3): 鼓励应助！ 2011-10-22 15:31:18
76bp太小了吧，标记的marker不知道多大？
不要等电泳跑完再照相，不然基本看不到小的那条带。。。
可以等电泳跑上10分钟照一照，这样或许会看到。。。
不过我奇怪的是楼主为什么要看到那段76bp的条带呢？
对于你后期的实验有什么帮助或者别的什么原因呢？
赞一下(2人) 回复此楼
2楼2011-10-19 20:01:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★ ★
junxiao0320(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+3): 鼓励应助！ 2011-10-22 15:31:35
1. 加大质粒和上样量。我们一般用100~300ng的质粒，用20微升的酶切体系，然后跑10微升（留一半是防着电泳出问题，如样品孔漏之类的）。用小孔的胶，使样品更浓缩条带更亮。

2.缩短电泳时间，100V的话一般10分钟就可以了。跑久了75bp的条带就跑到胶外面了。
赞一下(2人) 回复此楼
4楼2011-10-19 21:01:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

三目

木虫 (小有名气)
★ ★
junxiao0320(金币+1):谢谢参与
wanhscn(金币+1): 鼓励应助！ 2011-10-22 15:31:54
你可以分两次单酶切看看结果，不过你这个3400的，跟质粒有点难分开啊
赞一下(2人) 回复此楼
6楼2011-10-19 23:06:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 25 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[公派出国] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 14/700 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 16/800 2026-11-01 07:01 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 17/850 2026-11-01 06:48 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +5 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 21/1050 2026-11-01 06:46 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:48 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 xvJS1BYDxvBS 2026-10-31 8/400 2026-11-01 05:43 by YXM1FDCSE8Bn
[找工作] 售SCI一区文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 05:41 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI文章，我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-30 15/750 2026-11-01 05:22 by YXM1FDCSE8Bn
[基金申请] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 3/150 2026-11-01 04:04 by YXM1FDCSE8Bn
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 8/400 2026-11-01 03:59 by YXM1FDCSE8Bn
[博后之家] 售SCI一区文章，我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 6/300 2026-11-01 03:56 by YXM1FDCSE8Bn
[考博] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 5/250 2026-11-01 02:25 by YXM1FDCSE8Bn
[公派出国] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 1uaZt2kAZj2S 2026-10-31 4/200 2026-11-01 00:41 by YXM1FDCSE8Bn
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 12/600 2026-11-01 00:15 by YXM1FDCSE8Bn
[教师之家] 售SCI-T0P文章，我:8O.5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 X5bHxOULxFqb 2026-10-30 13/650 2026-10-31 17:12 by hKe7U1kad5Sg
[考博] 2027博士申请-临床检验诊断学、病原生物学、微生物方向 50+3 yyh@ 2026-10-28 4/200 2026-10-31 12:47 by 可淡不可忘
[硕博家园] 越来越担心硕士毕业后没有竞争力了 +8 zuesli 2026-10-27 14/700 2026-10-30 22:44 by 好运连连公主
[文学芳草园] 闲聊 +3 myrtle 2026-10-25 6/300 2026-10-29 15:28 by myrtle
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭