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whuthefen

新虫 (初入文坛)

[求助] 基于氨基酸的系统发育树的构建

大家好。我最近构建系统发育树,我通过PCR扩增到功能基因片段,功能基因片段通过NCBI上面的blastx检索到最相似的氨基酸序列,然后构建氨基酸序列系统发育树。我的问题是:首先,这样做对吗?其次,同一个DNA序列,我通过BLASTn和BLASTx检索,发现BLASTn检索最相似的DNA序列和Blastx检索出最相似的氨基酸序列不是同一个片段,这就意味着基于氨基酸的系统发育树不能反映基于DNA的系统发育树?而什么时候选基于氨基酸的系统发育树,什么时候选基于DNA的系统发育树呢?我觉得,应该是看自己论文的需要,如果论文想反应DNA序列的遗传适应性,应该选基于DNA的系统发育树,如果倾向于功能分析,选择基于氨基酸的系统发育树。但是,这两个都可以反应同源关系吧,因为系统发育树基于相似性构建的,相似性大意味着可能是同源的。最后,我还有一个问题,如果要证明两个序列是同源的,如何证明呢?
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whuthefen

新虫 (初入文坛)

★ ★
wanhscn(金币+2): 鼓励交流! 2011-10-08 13:42:02
我同意楼主说的,系统进化树有一定的科学性,但是不绝对。其实进化树可能给你一个线索,你可以根据这个线索推断,进而在去证明自己的推断。楼主说,写文章的时候弱化这个问题,是指在写文章的时候,只是提到序列可能具有什么功能,和什么已知的片段相似,而不去可以讨论差异由多少,进而过多推断功能差别有多大吗?
我还想和楼主讨论一个问题,因为我刚刚接触进化树,有些不太确定的地方。我测出来的DNA序列进行氨基酸比对。首先,我把DNA翻译成氨基酸,为了保证翻译的正确性,我直接通过BLASTx搜索,搜索结果反映该序列最有可能正确的翻译,可能是从正向第1,2,或3个碱基开始翻译的,也可能从反向1,2,3个碱基翻译。然后直接根据这个提示,采用bioedit 和primer软件把DNA翻译过来。   楼主是如何翻译DNA的呢?有没有什么软件,能直接把DNA翻译成6种氨基酸,然后在通过比对找出最有可能的氨基酸。
3楼2011-10-08 13:06:31
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whuthefen

新虫 (初入文坛)

我很少上论坛,不太清楚该怎么称呼,不再叫你楼主
5楼2011-10-08 14:56:51
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