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bonbonzd

木虫 (小有名气)

[求助] pUC18和pBR322质粒的装载量分别是多少?

各位虫友,pUC18和pBR322质粒的装载量(可插入外源片段的大小)分别是多少?
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jjsh310

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by ben1147 at 2011-10-08 15:09:13
外源片段太大不会导致质粒本身有什么问题,几百K甚至上M的质粒自然界里也不是没有。问题在于作为克隆载体使用的质粒本身拷贝数很高,如果质粒过大,质粒在宿主细胞内的稳定性,质粒复制分离的完整性等等可能会受到 ...

我也一直在用pUC19连6.4k的片段,每次都连不上,我也在考虑是不是装载量的问题,发现片段缺失了一段。。。。是不是质粒复制过程中不稳定啦。
初来乍到··
8楼2015-03-17 13:18:42
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

朢有经验的大侠指导一下!
2楼2011-10-06 18:50:25
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857(金币+2): 鼓励积极回帖 2011-10-06 22:56:37
pBR322,4363bp;
pUC18/19是由pBR322改造来的,2.69kb,所以按照质粒载体的大小上限来说,pUC应该比pBR322装载量大1.5kb左右吧
显微镜下的世界很精彩!
3楼2011-10-06 22:49:41
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-10-07 07:22:47
pBR322克隆6kb大小的外源DNA片段还是问题不大的,加上他本身的4.4kb,差不多质粒载体的最佳大小也就是10左右吧……再高不过15kb,一般来说质粒超过20kb就基本不能整合进去了,按照这样的标准你算一下就是了呗

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显微镜下的世界很精彩!
4楼2011-10-06 23:05:07
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