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bonbonzd

木虫 (小有名气)

[求助] pUC18和pBR322质粒的装载量分别是多少?

各位虫友,pUC18和pBR322质粒的装载量(可插入外源片段的大小)分别是多少?
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-10-07 07:22:54
引用回帖:
5楼: Originally posted by bonbonzd at 2011-10-06 23:16:29:
谢谢你的回复,我的目的片段4kb,但是我也听过一种说法就是外源片段太大了在连接的时候不好连接,还有就是外源片段太大了会不会迫使质粒的双螺旋改变?

那样的话两个都行了,你随便选个用着合适的,不放心的话你还是用pUC18/19呗……双螺旋改变倒还不至于,因为酶切的缘故螺旋的改变是肯定的,连接上之后就没大问题了……其实现在用pBR322已经很少了吧,大多数都是以他为基础改良的……
显微镜下的世界很精彩!
6楼2011-10-06 23:20:28
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bonbonzd

木虫 (小有名气)

朢有经验的大侠指导一下!
2楼2011-10-06 18:50:25
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
zhang8826857(金币+2): 鼓励积极回帖 2011-10-06 22:56:37
pBR322,4363bp;
pUC18/19是由pBR322改造来的,2.69kb,所以按照质粒载体的大小上限来说,pUC应该比pBR322装载量大1.5kb左右吧
显微镜下的世界很精彩!
3楼2011-10-06 22:49:41
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asznpb

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★
rainwander(金币+1): 鼓励交流 2011-10-07 07:22:47
pBR322克隆6kb大小的外源DNA片段还是问题不大的,加上他本身的4.4kb,差不多质粒载体的最佳大小也就是10左右吧……再高不过15kb,一般来说质粒超过20kb就基本不能整合进去了,按照这样的标准你算一下就是了呗

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显微镜下的世界很精彩!
4楼2011-10-06 23:05:07
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