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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 提取DNA稀释太稀了怎么办
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树宝宝zyx

新虫 (小有名气)

[求助] 提取DNA稀释太稀了怎么办

我提取的DNA用TE稀释的，用了600ul,本来只需要150ul的，可是记错了，感觉太稀的话电泳跑出来的条带就不够量，请问有谁知道如何补救呢？
    还有一个问题就是我电泳跑出来的条带泳道内都呈现白色的长长拖带，是为什么呢，覆盖了全部泳道的。
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科研真辛苦！
1楼2011-09-27 17:49:28
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西瓜

荣誉版主 (知名作家)
★ ★ ★
wanhscn(金币+3): Good！ 2011-10-09 22:58:12
浓缩DNA不难，最简单的是加像碱裂解法手工提质粒那样，加2倍体积的无水乙醇或者1倍体积的异丙醇，室温放上10分钟（在冰上效果更好，直接放4度冰箱也行），然后12,000rpm离心5分钟就沉淀下来了（可以看到白色沉淀块）。敞开管口放上几分钟让乙醇挥发掉，再溶解即可。
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10楼2011-10-09 22:20:54
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查看全部 13 个回答

匿名

用户注销 (正式写手)
★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-09-28 07:24:03
本帖仅楼主可见
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2楼2011-09-27 18:05:41
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quiller2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
树宝宝zyx(金币+5): 2011-09-27 20:08:57
dhd997(金币+3): good 2011-09-28 07:24:16
1，你需要用酚仿重新抽提除蛋白质，或者用DNA回收KIT处理一下
2，如果浓缩的话，要么你用KIT重新吸附和溶解，要么用乙醇沉淀，都可以浓缩

3，先确定你用来做什么的，实验目的要清晰，很多处理确实不是那么重要
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致良知
3楼2011-09-27 19:10:55
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树宝宝zyx

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by facingworld at 2011-09-27 18:05:41:
拖带的话是蛋白质没有除尽，你可以浓缩一下哈，不过我没有做过，不知道效果怎么样，前天世界在哪儿浓缩了

恩，浓缩的话是因为我想条带跑得好一点，用来写文章的时候放上去的，因为被我稀释太多所以感觉条带有点淡。不知道是不是这个原因。还有那个蛋白质的问题，我测出来的260/230达到1.8，感觉以前的没达到这个数的也没有这样的。不知道加样和跑条带染色这些步骤会不会对结果也有影响呢。我平时都是加10ul提取液1ul上样缓冲液，60V跑1个小时多点，EB染色10min。
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科研真辛苦！
4楼2011-09-27 20:14:28
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