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settleryy

金虫 (小有名气)


[交流] HPLC重复性不好是什么原因呢

最近做了个实验,同一个样品配置成1mg/ml,2mg/ml,4mg/ml和10mg/ml四个不同浓度,跑完柱子,用面积归一法计算其中一个组分的相对百分含量,结果四个浓度出来的结果都不一样,相差比较大。这是为什么呢!
同一个样品,即使浓度不一样,但是其内部组分相对含量应该一样的吧,有点搞不懂。想请教请教~~
另外同一个样品连续进样几次,发现结果也有不小差距,重复性不好,是怎么回事呢~~
谢谢~~
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lemonin2008

铁杆木虫 (正式写手)



settleryy(金币+1):谢谢参与
各成分的响应值不一样吧
9楼2011-09-27 18:29:42
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xql0518

银虫 (小有名气)



settleryy(金币+1):谢谢参与
“同一个样品,即使浓度不一样,但是其内部组分相对含量应该一样的吧” 楼主这句话话非也,本身这句话是没什么问题,但是你样品浓度低,使得你样品中杂质相对于仪器来说响应很低或者说是检不出,而且你用的面积归一法,出现这种情况,主含量往往偏高,当你样品浓度变高,有些在低浓度情况下检不出来或者响应很低的物质,也随着样品主含量增加而增加从而被仪器检测出来了,这样自然而来用面积归一法测定的话样品主含量会降低。
2楼2011-09-27 14:09:49
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xql0518

银虫 (小有名气)


你说的样品重复性差原因很多,样品可能在柱中残留比较严重,进样过程是否有气泡产生,柱子是否平衡好,另外楼主说的重复性不是很好,那样品重复性RSD是多少呢?
3楼2011-09-27 14:23:48
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settleryy

金虫 (小有名气)


引用回帖:
2楼: Originally posted by xql0518 at 2011-09-27 14:09:49:
“同一个样品,即使浓度不一样,但是其内部组分相对含量应该一样的吧” 楼主这句话话非也,本身这句话是没什么问题,但是你样品浓度低,使得你样品中杂质相对于仪器来说响应很低或者说是检不出,而且你用的面积归 ...

恩,是有这种情况,但是不知道为什么我的是1mg/ml浓度,结果9.6%;2mg/ml为7.8%;4mg/ml为5.6%;而10mg/ml为6.1%。好像没有什么规律~~
4楼2011-09-27 14:24:55
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