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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药物分析 » 【求助】HPLC重复性的问题
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wsjzpf

木虫 (正式写手)

[交流] 【求助】HPLC重复性的问题 已有13人参与

各位：
我在做HPLC的时候，进120微升的时候，两个挨着很近的峰能分开，但是在进样量加到260微升的时候，两个峰没分开，就很大的重叠性！请问各位，这是怎么回事呢？谢谢各位不吝赐教！
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1楼 2010-06-26 22:10:37
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sunnybluesea

银虫 (正式写手)

QQ:125691117
★
wsjzpf(金币+1):谢谢！再接再厉！ 2010-06-26 22:25:43
狼狼晴空(金币+1):谢谢交流 2010-06-27 16:41:15
120微升的勉强分开，260微升肯定分不开啊，减少进样体积！
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微信：sunnyblue323
2楼2010-06-26 22:16:12
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xuwen78

禁虫 (小有名气)
★
狼狼晴空(金币+1):谢谢交流 2010-06-27 16:41:51
wsjzpf(金币+1):谢谢！再接再厉! 2010-06-28 12:02:17
本帖内容被屏蔽
3楼2010-06-26 22:49:42
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求学小子

金虫 (小有名气)
wsjzpf(金币+1):谢谢！但是主峰很低啊 2010-06-28 12:02:48
进样量超载了，柱子的柱效自然降低。一般我们做HPLC也没有进样那么大的，通常都是5ul、10ul。
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4楼2010-06-26 23:07:24
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fwcyue

木虫 (正式写手)
wsjzpf(金币+1):谢谢！再接再厉！ 2010-06-28 12:03:06
进样量太大了，影响分离效果
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5楼2010-06-26 23:11:48
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焦国正

至尊木虫 (著名写手)

joanlking
wsjzpf(金币+1):谢谢！再接再厉！ 2010-06-28 12:03:20
减少进样量，降低流速，换梯度
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6楼2010-06-26 23:44:49
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chenjiajiang198

至尊木虫 (著名写手)
★
karl2100(金币+1):3Q 2010-06-27 21:17:22
wsjzpf(金币+1):谢谢！再接再厉！ 2010-06-28 12:03:39
进样量越大 整个峰完全出来的时间就会先对长一点 所以你在相同的条件下增大了进样量没有分开
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7楼2010-06-26 23:58:59
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有点不喜欢

金虫 (正式写手)
wsjzpf(金币+1):是制备的！ 2010-06-29 17:04:12
你应该是作分析吧？怎么会有那么大的进样量呢？一般情况下的进样量都是20ul及低于20ul的，建议你降低进样量，或是改变流动相来改善分离！
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希望能多多学习！
8楼2010-06-29 11:05:28
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rayliu725

新虫 (小有名气)
一般都有定量环啊 不会超过20的
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9楼2010-06-29 11:07:30
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有点不喜欢

金虫 (正式写手)
引用回帖:
Originally posted by 有点不喜欢 at 2010-06-29 11:05:28:
你应该是作分析吧？怎么会有那么大的进样量呢？一般情况下的进样量都是20ul及低于20ul的，建议你降低进样量，或是改变流动相来改善分离！

那就有可能是你的柱子过载，或是流动相的洗脱能力不够，要好好摸索条件！
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希望能多多学习！
10楼2010-06-30 10:35:47
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