应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC如何分开两峰
111/2返回列表12下一页
查看: 2516  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fair72

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC如何分开两峰 已有4人参与

用HPLC1100做槟榔药材的生物碱含量测定，测定三种生物碱：去甲基槟榔次碱，槟榔次碱，槟榔碱，此顺序也为出峰顺序，用0.5%磷酸和乙腈（40:60）等度洗脱，所有峰可以在10min内出完，但图谱之中，槟榔次碱峰总是连着另一个未知峰，而且连得很紧，怎么分都分不开，影响了槟榔次碱的含量测定，而且同样的样品我进样的重现性也差，请问怎样才能分开两峰呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
没有失败，只有放弃
1楼 2010-08-10 20:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pplover

荣誉版主 (著名写手)
你说的怎么分都分不开，是都用过什么方法啊？仅改变了磷酸和乙腈的比例，还是其他流动相也尝试过了呢？如果酸化过强，对柱子的分离效果也有影响的。我们一般用的是0.1%的磷酸水。
赞一下 回复此楼
一个人的美丽是认真！两个人能在一起是缘分！
2楼2010-08-10 21:04:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huht

木虫 (小有名气)
楼主的意思应该是调整了比例也没分开，可以尝试不同ph值或更换其它缓冲盐试试
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-10 22:06:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
如果那两个连在一起的峰是同分异构体，lz就杯具了。可是试试加单标，用来确定是否为同分异构体，如果是，建议考虑别的定量和定性的方法，RP-HPLC很难分开同分异构体。如果不是同分异构体，建议考虑调整流动相pH值。
赞一下 回复此楼
4楼2010-08-11 06:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clyinsui

禁虫 (小有名气)
fair72(金币+1):将有机相的比例调小了10%,效果还可以 2010-08-12 09:44:18
本帖内容被屏蔽
5楼2010-08-11 08:04:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fair72

银虫 (小有名气)
谢谢各位高手的指点，我换过流动相的比例，0.5%磷酸参照的是文献，还没有变过，可以去尝试一下，PH原来用三乙胺调的3.8，后来调到3.5，分离效果没有改善，就没有调了，应该不是同分异构体，不知各位还可否指点一下，而且同样的方法一个月以前做的比现在做的分离效果要好
赞一下 回复此楼
没有失败，只有放弃
6楼2010-08-11 09:34:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiusjiu

木虫 (正式写手)
生物碱本来就很难分离，楼主提到的三种生物碱要想较好的分离度和峰型最好尝试采用极性C18来梯度分离。至于重复性原因是楼主采用的添加剂为磷酸，建议采用盐来分离这样会更好一些
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-11 13:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feifei28

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
调流动相比例，或者换流动相试试应该能解决的
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-08-16 22:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Kim289

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知楼主的HPLC能否调柱温， 我曾经遇到过类似的问题， 因为我们当时的柱温是室温，春天的保留时间和夏天的保留时间有出入， 还有分峰效果也有所差别
赞一下(1人) 回复此楼
好好学习，天天向上！
9楼2010-08-17 08:12:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiamingw

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果说一个月以前还能分开，现在分不开了，那有可能是柱效下降了，如果尝试了前面人说的方法还不能分开，那要考虑换柱子了。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-08-17 09:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fair72 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 求调剂 +12 MAX怅惘 2026-04-09 13/650 2026-04-09 23:32 by cls512
[考研] 材料专硕调剂 +16 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-07 17/850 2026-04-09 21:16 by wutongshun
[考研] 考研调剂-材料类-284 +28 想换手机不想解� 2026-04-08 28/1400 2026-04-09 20:08 by 倒数321?
[考研] 267求调剂 +5 再忙也要吃饭啊 2026-04-09 5/250 2026-04-09 18:47 by stone_128
[考研] 334求调剂 +16 Riot2025 2026-04-08 17/850 2026-04-09 09:28 by wdyheheeh
[考研] 求调剂 +8 吃口冰激凌 2026-04-07 8/400 2026-04-09 08:03 by 5268321
[考研] 调剂 +22 不逢春 2026-04-07 23/1150 2026-04-09 08:01 by Sammy2
[考研] 281求调剂 +10 椰子蘑菇 2026-04-06 10/500 2026-04-08 11:43 by zzucheup
[考研] 080500求调剂 +12 黄宇博 2026-04-06 12/600 2026-04-07 12:41 by upczlm1989
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 071000生物学调剂 +7 拉提桃 2026-04-06 7/350 2026-04-06 18:55 by 52305043001
[考研] 求调剂 +10 chenxrlkx 2026-04-05 10/500 2026-04-06 11:31 by 猪会飞
[考研] 考研调剂 +5 美丽的youth_ 2026-04-04 6/300 2026-04-06 06:57 by houyaoxu
[考研] 284求调剂 +7 徐同学_001 2026-04-04 13/650 2026-04-05 17:19 by yulian1987
[考研] 085600调剂 +9 东照照照 2026-04-04 9/450 2026-04-05 13:44 by ujn_zhuj
[考研] 083200 333求调剂 +3 十二！！ 2026-04-04 3/150 2026-04-05 08:28 by barlinike
[考研] 能动调剂326专硕 +4 wan112233 2026-04-04 4/200 2026-04-04 22:47 by yu221
[考研] 本科211，专业085404，293分请求调剂 +5 莲菜就是藕吧 2026-04-04 5/250 2026-04-04 14:08 by 这是一个无聊的�
[考研] 材料调剂 +11 吴棂颖！ 2026-04-03 11/550 2026-04-04 09:56 by 小小树2024
[考研] 数一英一285求调剂 +7 AZMK 2026-04-03 9/450 2026-04-03 13:03 by ms629
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭