应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 分析 » 色谱质谱 » 【求助】HPLC如何分开两峰
111/2返回列表12下一页
查看: 2525  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

fair72

银虫 (小有名气)

[交流] 【求助】HPLC如何分开两峰 已有4人参与

用HPLC1100做槟榔药材的生物碱含量测定，测定三种生物碱：去甲基槟榔次碱，槟榔次碱，槟榔碱，此顺序也为出峰顺序，用0.5%磷酸和乙腈（40:60）等度洗脱，所有峰可以在10min内出完，但图谱之中，槟榔次碱峰总是连着另一个未知峰，而且连得很紧，怎么分都分不开，影响了槟榔次碱的含量测定，而且同样的样品我进样的重现性也差，请问怎样才能分开两峰呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
没有失败，只有放弃
1楼 2010-08-10 20:45:52
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pplover

荣誉版主 (著名写手)
你说的怎么分都分不开，是都用过什么方法啊？仅改变了磷酸和乙腈的比例，还是其他流动相也尝试过了呢？如果酸化过强，对柱子的分离效果也有影响的。我们一般用的是0.1%的磷酸水。
赞一下 回复此楼
一个人的美丽是认真！两个人能在一起是缘分！
2楼2010-08-10 21:04:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

huht

木虫 (小有名气)
楼主的意思应该是调整了比例也没分开，可以尝试不同ph值或更换其它缓冲盐试试
赞一下 回复此楼
3楼2010-08-10 22:06:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

xiaoxiao7239

木虫 (小有名气)
如果那两个连在一起的峰是同分异构体，lz就杯具了。可是试试加单标，用来确定是否为同分异构体，如果是，建议考虑别的定量和定性的方法，RP-HPLC很难分开同分异构体。如果不是同分异构体，建议考虑调整流动相pH值。
赞一下 回复此楼
4楼2010-08-11 06:37:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

clyinsui

禁虫 (小有名气)
fair72(金币+1):将有机相的比例调小了10%,效果还可以 2010-08-12 09:44:18
本帖内容被屏蔽
5楼2010-08-11 08:04:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

fair72

银虫 (小有名气)
谢谢各位高手的指点，我换过流动相的比例，0.5%磷酸参照的是文献，还没有变过，可以去尝试一下，PH原来用三乙胺调的3.8，后来调到3.5，分离效果没有改善，就没有调了，应该不是同分异构体，不知各位还可否指点一下，而且同样的方法一个月以前做的比现在做的分离效果要好
赞一下 回复此楼
没有失败，只有放弃
6楼2010-08-11 09:34:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiusjiu

木虫 (正式写手)
生物碱本来就很难分离，楼主提到的三种生物碱要想较好的分离度和峰型最好尝试采用极性C18来梯度分离。至于重复性原因是楼主采用的添加剂为磷酸，建议采用盐来分离这样会更好一些
赞一下 回复此楼
7楼2010-08-11 13:12:45
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

feifei28

新虫 (初入文坛)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
调流动相比例，或者换流动相试试应该能解决的
赞一下(1人) 回复此楼
8楼2010-08-16 22:00:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Kim289

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
不知楼主的HPLC能否调柱温， 我曾经遇到过类似的问题， 因为我们当时的柱温是室温，春天的保留时间和夏天的保留时间有出入， 还有分峰效果也有所差别
赞一下(1人) 回复此楼
好好学习，天天向上！
9楼2010-08-17 08:12:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

jiamingw

金虫 (小有名气)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
如果说一个月以前还能分开，现在分不开了，那有可能是柱效下降了，如果尝试了前面人说的方法还不能分开，那要考虑换柱子了。
赞一下(1人) 回复此楼
10楼2010-08-17 09:25:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 fair72 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 中科院总分315求调剂 +5 lallalh 2026-04-09 5/250 2026-04-10 12:02 by pengliang8036
[考研] 江苏大学 工科调剂 捡漏 +3 Evan_Liu 2026-04-09 5/250 2026-04-10 10:22 by Evan_Liu
[考研] 266求调剂 +28 阳阳哇塞 2026-04-07 28/1400 2026-04-10 10:02 by cyh—315
[考研] 22408调剂求助 +3 毂12 2026-04-09 5/250 2026-04-09 23:21 by zhouyuwinner
[考研] 266求调剂，一志愿哈工程电子信息，本科获多项国奖和省奖 +4 lumine1 2026-04-06 4/200 2026-04-09 17:38 by vgtyfty
[考研] 337求调剂 +4 Gky09300550， 2026-04-09 4/200 2026-04-09 17:18 by 帕尔马拉特
[考研] 262求调剂 +10 天下第一文 2026-04-04 13/650 2026-04-09 15:16 by 探123
[考研] 368化学求调剂 +13 wwwwabcde 2026-04-07 14/700 2026-04-09 14:47 by heaven_jay
[考研] 318求调剂 +13 ykyhsa 2026-04-05 15/750 2026-04-08 21:37 by wj165256
[考研] 301求调剂 +18 121. 2026-04-04 18/900 2026-04-07 17:49 by 蓝云思雨
[考研] 材料调剂 +11 一样YWY 2026-04-07 11/550 2026-04-07 15:13 by shdgaomin
[考研] 319分085702安全工程求调剂 +6 rious 2026-04-05 6/300 2026-04-07 09:42 by jp9609
[考研] 求调剂 +4 电气小神童 2026-04-04 6/300 2026-04-07 00:14 by guanxin1001
[考研] 工科370求调剂 +3 溏心煎鸡蛋 2026-04-05 3/150 2026-04-06 10:55 by 这是一个无聊的�
[考研] 324求调剂 +3 k可乐 2026-04-05 4/200 2026-04-06 09:54 by 蓝云思雨
[考研] 0854求调剂 +4 assdll 2026-04-04 4/200 2026-04-05 09:44 by zhq0425
[考研] 调剂 +8 熊二想上岸 2026-04-04 8/400 2026-04-05 05:27 by houyaoxu
[考研] 278求调剂 +14 范婷娜 2026-04-04 15/750 2026-04-04 22:15 by lqwchd
[考研] 283求调剂 +4 mcbbc 2026-04-03 5/250 2026-04-04 20:51 by imissbao
[考研] 292求调剂 +11 2022080213 2026-04-04 13/650 2026-04-04 18:38 by macy2011
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭