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小周铁杆木虫 (著名写手)
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[求助]
了解Kozak序列的帮我一下
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最近在构建一个载体，把目的基因插到pVAX1中，在pVAX1说明书中有如下一段描述：插入的目的基因必须含有 Kozak 翻译起始序列和起始密码子ATG。 Kozak 的一个例子是ANNATGG，-3位的A和+4位的G最为重要。 我的问题是：我的基因编码的起始几位是atgtac，前面的A可以通过引物设计加上，可是+4位的G该怎么办？如果强行将原来的T变成G或者在起始ATG之间加上一个Kozak序列，这样我的目的蛋白就发生氨基酸序列的改变了，这是我不想要的。 另外我还看了些文献说Kozak对蛋白的翻译影响还是比较大的。 谢谢啦！ pVAX1© is a nonfusion vector.Your insert must contain a Kozak translation initiation sequence and an initiation codon (ATG) for proper initiation of translation (Kozak, 1987; Kozak, 1991; Kozak, 1990). An example of a Kozak consensus sequence is provided below. Please note that other sequences are possible (see references above), but the A at position -3 and the G at position +4 are the most critical (shown in bold). The ATG initiation codon is shown underlined. ANNATGG |
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