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小周

铁杆木虫 (著名写手)

[求助] 了解Kozak序列的帮我一下

最近在构建一个载体,把目的基因插到pVAX1中,在pVAX1说明书中有如下一段描述:插入的目的基因必须含有 Kozak 翻译起始序列和起始密码子ATG。 Kozak 的一个例子是ANNATGG,-3位的A和+4位的G最为重要。
我的问题是:我的基因编码的起始几位是atgtac,前面的A可以通过引物设计加上,可是+4位的G该怎么办?如果强行将原来的T变成G或者在起始ATG之间加上一个Kozak序列,这样我的目的蛋白就发生氨基酸序列的改变了,这是我不想要的。
另外我还看了些文献说Kozak对蛋白的翻译影响还是比较大的。
谢谢啦!

pVAX1© is a nonfusion vector.Your insert must contain a Kozak translation initiation sequence and an initiation codon (ATG) for proper initiation of translation (Kozak, 1987; Kozak, 1991; Kozak, 1990). An example of a Kozak consensus sequence is provided below. Please note that other sequences are possible (see references above), but the A at position -3 and the G at position +4 are the most critical (shown in bold). The ATG initiation codon is shown underlined.
ANNATGG
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yidC423R

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

小周(金币+2): THANKS! 2011-09-22 16:59:48
Just forget about the +4 position. It should be fine.
2楼2011-09-21 21:13:54
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小周

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by yidC423R at 2011-09-21 21:13:54:
Just forget about the +4 position. It should be fine.

REALLY?
3楼2011-09-22 17:00:28
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