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串联重复序列的基因构建
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sayfxxk2u
新虫
(小有名气)
应助: 1
(幼儿园)
金币: 253.4
帖子: 107
在线: 13小时
虫号: 1080276
[交流]
串联重复序列的基因构建
有时候,要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次,4次。如果基因不大,可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话,选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因,要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因后,也可以自己载入载体。
1,上游引入酶切位点ab,下游引酶切位点c。b和c是同尾酶。,
2,PCR扩增出ab-A-c,先双酶切某载体和ab-A-c酶切位点a和c,构成载体-ab-A-c。
3,再酶切PCR产物ab-A-c的酶切位点a和c和载体-ab-A-c中的酶切位点a和b,
构成ab-A-b-()A-c。()表示b,c同尾结合。
4,重复3,构成ab-A-b-()-A-b-()-A-c。
如果A基因的后端已经有了一个酶切位点,只要在欲串联重复的基因末端加上一个同尾酶的酶切位点,就行。
欢迎交流。。
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1楼
2011-09-09 01:02:56
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lulushuo
铁虫
(初入文坛)
应助: 0
(幼儿园)
金币: 103.5
帖子: 33
在线: 29.4小时
虫号: 2015334
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如何重复单元间需要无痕连接呢?怎样能做到?
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3楼
2015-12-30 14:19:18
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yuzhiming
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虫号: 48471
引用回帖:
1241421楼
:
Originally posted by
sayfxxk2u
at 2011-09-09 01:02:56:
有时候,要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次,4次。如果基因不大,可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话,选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因,要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因 ...
怎么测序呢?
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2楼
2012-05-09 12:44:02
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