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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)


[交流] 串联重复序列的基因构建

有时候,要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次,4次。如果基因不大,可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话,选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因,要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因后,也可以自己载入载体。
1,上游引入酶切位点ab,下游引酶切位点c。b和c是同尾酶。,
2,PCR扩增出ab-A-c,先双酶切某载体和ab-A-c酶切位点a和c,构成载体-ab-A-c。
3,再酶切PCR产物ab-A-c的酶切位点a和c和载体-ab-A-c中的酶切位点a和b,
构成ab-A-b-()A-c。()表示b,c同尾结合。
4,重复3,构成ab-A-b-()-A-b-()-A-c。
如果A基因的后端已经有了一个酶切位点,只要在欲串联重复的基因末端加上一个同尾酶的酶切位点,就行。

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yuzhiming

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引用回帖:
1241421楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-09 01:02:56:
有时候,要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次,4次。如果基因不大,可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话,选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因,要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因 ...

怎么测序呢?
2楼2012-05-09 12:44:02
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lulushuo

铁虫 (初入文坛)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
如何重复单元间需要无痕连接呢?怎样能做到?
3楼2015-12-30 14:19:18
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