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sayfxxk2u

新虫 (小有名气)

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[交流] 串联重复序列的基因构建

有时候，要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次，4次。如果基因不大，可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话，选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因，要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因后，也可以自己载入载体。
1，上游引入酶切位点ab，下游引酶切位点c。b和c是同尾酶。,
2，PCR扩增出ab-A-c，先双酶切某载体和ab-A-c酶切位点a和c，构成载体-ab-A-c。
3，再酶切PCR产物ab-A-c的酶切位点a和c和载体-ab-A-c中的酶切位点a和b，
构成ab-A-b-（）A-c。（）表示b，c同尾结合。
4，重复3，构成ab-A-b-（）-A-b-（）-A-c。
如果A基因的后端已经有了一个酶切位点，只要在欲串联重复的基因末端加上一个同尾酶的酶切位点，就行。

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1楼 2011-09-09 01:02:56

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yuzhiming

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引用回帖:

1241421楼: Originally posted by sayfxxk2u at 2011-09-09 01:02:56:
有时候，要做串联重复的序列。要把某段基因重复2次，4次。如果基因不大，可以选择合成。但是如果要串联重复的次数多的话，选择合成就不是一个划算的方法。
假设A基因，要串联重复6段。
可以加A基因加在某段基因 ...

怎么测序呢？