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niuniu2010

铜虫 (初入文坛)

[求助] 设计的引物错了一个碱基对后续试验影响大吗?

如题,设计的引物错了一个碱基,用它所扩增出的目的片段有问题吗?
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lixingliang

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
dhd997(金币+2): 鼓励交流 2011-09-05 18:38:47
niuniu2010(金币+2): 2011-09-06 08:31:37
不知道楼主克隆这个基因是用来做什么,如果是用于表达蛋白,就需要看看会不会产生移码突变,如果单单是克隆一个基因,那影响应该不大
我不管你看起看不起我,我都是个演员
4楼2011-09-05 17:52:37
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查看全部 7 个回答

瓶儿花

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★
wanhscn(金币+1): 有时做标记时,为了照顾酶切位点,只能在引物上选错配。 2011-09-05 17:00:25
你如果是用作表达的话,你查一下这个碱基编码的蛋白跟原始的有没有差异,会不会有影响就可以了。如果单单是克隆序列的话,研究基因功能一般是没多大影响的,除非你的碱基跟相邻碱基变成终止密码子了。
另外 ,如果是在5‘端,影响不大。有的时候引物设计酶切位点就是要把碱基换掉的呀!
2楼2011-09-05 16:49:21
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love_st

金虫 (著名写手)


引用回帖:
2楼: Originally posted by 瓶儿花 at 2011-09-05 16:49:21:
你如果是用作表达的话,你查一下这个碱基编码的蛋白跟原始的有没有差异,会不会有影响就可以了。如果单单是克隆序列的话,研究基因功能一般是没多大影响的,除非你的碱基跟相邻碱基变成终止密码子了。
另外 ,如 ...

全面
3楼2011-09-05 16:55:41
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niuniu2010

铜虫 (初入文坛)

我目的是为了表达蛋白用的,如果不产生移码突变是不是问题就不大呀?
5楼2011-09-06 08:42:24
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