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【求助/交流】已知N端11个氨基酸序列如何设计引物
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honglanbai
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[交流]
【求助/交流】已知N端11个氨基酸序列如何设计引物
已知N端11个氨基酸序列如何设计引物啊,C端打算用OligoDT引物。就知道这几个氨基酸,还用找保守区吗?
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2011-01-06 13:19:33
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-06 15:35:25
如果是我做,我会用C端的ODT前面随便加几个序列先试试看,看能不能拉出来,如果不出再分段扩就要找保守序列了。
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2011-01-06 13:24:16
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-06 15:35:35
利用N端5-6个氨基酸设计兼并一条引物。
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2011-01-06 14:35:01
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dhd997(金币+1):鼓励交流 2011-01-06 15:35:44
honglanbai(金币+1): 2011-03-08 14:27:17
我会从这N端这些氨基酸,blast找到蛋白序列,确定什么基因,在设计引物验证自己的推断!
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2011-01-06 14:37:00
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blast不到完全一样的氨基酸序列,一般都差一个或两个氨基酸
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2011-01-06 14:53:41
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一共才11个氨基酸
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2011-01-06 14:58:11
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dhd997(金币+2):谢谢交流 2011-01-10 16:42:58
honglanbai(金币+1): 2011-03-08 14:27:05
差几个也是一样能扩出来的,当然普通Taq可以,高保真酶就不行了,先用Taq扩,等扩出来了大概的序列知道了再用高保真的酶扩,一般是这个流程吧
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2011-01-10 15:52:22
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