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呼呼xinong

铁虫 (初入文坛)

[交流] 3'RACE测序结果求助 已有10人参与

本人现在做3race,测序结果存在一种现象,不知各位大侠遇到过没?在此求揭示!本人按照clontech的试剂盒做的结果,pcr,切胶回收,连接后转化,挑单克隆跑pcr,检查到目的条带后每个基因送测10个菌。测序结果都是我要的基因,但是相同基因不同菌落的序列之间存在差异,即在靠近polyA处,序列长短不一,也就是说3’UTR序列长短不一,但是前提条件是短的序列测序结果也含有polyA。请问这是什么现象?如何选择序列?
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青青草allan

银虫 (小有名气)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
引用回帖:
6楼: Originally posted by suguolian at 2013-09-11 10:13:57
我也做3‘-RACE,用的是特异性引物,PCR结果出现了单一条带,但是没达到预期的长度,是什么原因呢??请教高人指点……谢谢

同样的问题,不知道怎么解释。很可能是非特异性扩增。拿去测个序试试。
爱出者爱返,福往者福来
9楼2014-09-12 16:30:36
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