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huazi5853

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[求助] 考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值！！！求助

小弟用内含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 缓冲液去除猪皮中的非胶原蛋白，4℃条件下处理24h，取滤液，用考马斯亮蓝法测滤液中蛋白含量，以蒸馏水为空白样，测A595nm，结果发现待测液波长是负值，很迷惑，求大侠指点，谢谢！！

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十年修得同船渡

1楼 2011-08-26 16:17:19

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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, BioEPI+1): 鼓励应助 2011-08-28 13:06:04

引用回帖:

1楼: Originally posted by huazi5853 at 2011-08-26 16:17:19:
小弟用内含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 缓冲液去除猪皮中的非胶原蛋白，4℃条件下处理24h，取滤液，用考马斯亮蓝法测滤液中蛋白含量，以蒸馏水为空白样，测A595nm，结果发现待测液波长是负值，很迷惑，求大侠指 ...

我用BCA法的，感觉线性范围比较大，比考染大多了。图中横轴是BSA含量，微克，纵轴是OD562与空白对照的差值。