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huazi5853

银虫 (初入文坛)

[求助] 考马斯亮蓝法测蛋白含量时吸光度A595nm为负值!!!求助

小弟用内含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 缓冲液去除猪皮中的非胶原蛋白,4℃条件下处理24h,取滤液,用考马斯亮蓝法测滤液中蛋白含量,以蒸馏水为空白样,测A595nm,结果发现待测液波长是负值,很迷惑,求大侠指点,谢谢!!
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【答案】应助回帖

★ ★
amisking(金币+2, BioEPI+1): 鼓励应助 2011-08-28 13:06:04
引用回帖:
1楼: Originally posted by huazi5853 at 2011-08-26 16:17:19:
小弟用内含4mol/L NaCl 的0.05M Tris-HCl 缓冲液去除猪皮中的非胶原蛋白,4℃条件下处理24h,取滤液,用考马斯亮蓝法测滤液中蛋白含量,以蒸馏水为空白样,测A595nm,结果发现待测液波长是负值,很迷惑,求大侠指 ...

我用BCA法的,感觉线性范围比较大,比考染大多了。图中横轴是BSA含量,微克,纵轴是OD562与空白对照的差值。

流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼2011-08-28 02:05:18
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