| 查看: 3038 | 回复: 9 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
关于SiRNA表达载体构建的问题
|
||
|
请各位高人指点一下，我在构建SiRNA表达载体时遇到一个问题，在酶切空载体凝胶电泳胶回收纯化后，线性载体与目的片段按1:10的比例进行连接，转化DH5a感受态细菌后，在含卡那霉素的培养板上能够长出多个单菌落，但是每次提取质粒鉴定时，所提取的质粒远大于8.8Kb左右的目的质粒（见图）。做了很多次都是这样，很郁闷，只有一次构建成功并测序正确。所用的试剂盒：Sfi-I限制性内切酶、T4连接酶为NEB,胶回收纯化试剂盒为PROMEGA。 望各位高人指点，不胜感激！  |
回复此楼» 猜你喜欢
Wnt-C59：PORCN靶向化学探针，Wnt信号通路阻断机制与科研应用全解析
已经有0人回复
-
Fexaramine：肠道限制性FXR化学探针，结构特征与信号通路研究全解析
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有185人回复
-
NVS-STG2：靶向STING跨膜域的分子胶类激动剂，结构特征与寡聚化机制研究全解析
已经有0人回复
-
DOTA-GPC3肽（CAS 3066439-94-6）：双功能分子探针前体的结构特征与标记应用解析
已经有0人回复
-
科研用 TLR7/8 双激动剂怎么选？现货与质控要点
已经有0人回复
-
SEL120-34A HCl：CDK8/CDK19高选择性激酶抑制剂
已经有0人回复
-
氢氧化钾活化操作
已经有18人回复
-
散金
已经有68人回复
-
生物质超级电容器
已经有0人回复
» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 请教siRNA转染的几个问题
已经有11人回复
- 表达载体的构建
已经有17人回复
- 表达载体构建的相关问题
已经有15人回复
- 已知全长基因怎样克隆并构建表达载体
已经有8人回复
- 双酶切连接表达载体，两个月都没做出来，问题到底出在哪里呢~？求指点
已经有52人回复
- SIRNA
已经有34人回复
- 【求助/交流】表达载体构建不成功的原因
已经有27人回复
- 【求助/交流】酿酒酵母真核表达载体构建和连接的问题
已经有6人回复
6楼2011-08-30 09:49:52
ganchao1776
至尊木虫 (职业作家)
- MolEPI: 12
- 应助: 18 (小学生)
- 金币: 11643.1
- 散金: 1811
- 红花: 30
- 帖子: 3408
- 在线: 900.8小时
- 虫号: 330935
- 注册: 2007-03-24
- 性别: GG
- 专业: 生物大分子结构与功能
2楼2011-08-22 09:57:43
3楼2011-08-25 23:20:10
5楼2011-08-26 10:47:24
