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乙二醛处理的细胞,RNA总也提不好,怎么办啊?
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各位好! 我最近用乙二醛处理贴壁细胞后,用trizol提总RNA,260/280 总是在1.5 左右徘徊(而未用乙二醛处理的细胞就没这问题,比值在1.8以上),这样质量的RNA 做了逆转录,效率就很低。请问各位,这是什么原因?我改怎么办才能提高质量? 刚开始,实验室的老师们认为是细胞没有裂解好(在显微镜下看,的确细胞都没 被trizol裂解,形态完好),我用用加trizol后液氮和37度反复冻融四次,结果比值原来还低。是不是乙二醛使得蛋白和RNA发生了交联? 多谢,各位同道!! |
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