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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 求细菌破壁方法
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小嫩瓜

木虫 (小有名气)

[求助] 求细菌破壁方法

我要提DNA测序，进而对所筛菌进行鉴定。买的试剂盒破壁是要区分革兰氏阳性菌与阴性菌。自己配的革兰氏染色试剂，害怕染色结果不正确。所以想问问有没有做过细菌破壁的，用什么方法做的？
谢谢！
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1楼 2011-08-15 15:28:00
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kingleo99

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-15 18:02:51
其实若是做细菌16S rna 基因PCR扩增和鉴定那么你直接可以将细菌菌落少许放入PCR管中加入其他的东西后直接扩增。要是选择破壁的话可以选择SDS-CTAB法，微波炉法这些方法都很常规。
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科学就是发现规律，而规律是上帝创造的，认识独一上帝就是智慧。
3楼2011-08-15 16:53:23
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-15 16:38:13
小嫩瓜(金币+2): 2011-08-16 12:26:33
一般的试剂盒都应该能提出来。如果提不出来，可以反复冻容几次，或者液氮研磨
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2楼2011-08-15 16:18:03
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blackrose8089
引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfebst at 2011-08-15 16:18:03:
一般的试剂盒都应该能提出来。如果提不出来，可以反复冻容几次，或者液氮研磨

4楼2011-08-15 17:12:57
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-16 08:49:36
超声破壁法。溶菌酶法。冻融法。有机溶剂溶解法等。
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微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
5楼2011-08-15 22:12:10
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