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小嫩瓜

木虫 (小有名气)

[求助] 求细菌破壁方法

我要提DNA测序,进而对所筛菌进行鉴定。买的试剂盒破壁是要区分革兰氏阳性菌与阴性菌。自己配的革兰氏染色试剂,害怕染色结果不正确。所以想问问有没有做过细菌破壁的,用什么方法做的?
谢谢!
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活的艰辛是因为执着和不放弃
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kingleo99

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-15 18:02:51
其实若是做细菌16S rna 基因PCR扩增和鉴定那么你直接可以将细菌菌落少许放入PCR管中加入其他的东西后直接扩增。要是选择破壁的话可以选择SDS-CTAB法,微波炉法这些方法都很常规。
科学就是发现规律,而规律是上帝创造的,认识独一上帝就是智慧。
3楼2011-08-15 16:53:23
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wolfebst

至尊木虫 (职业作家)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-15 16:38:13
小嫩瓜(金币+2): 2011-08-16 12:26:33
一般的试剂盒都应该能提出来。如果提不出来,可以反复冻容几次,或者液氮研磨
2楼2011-08-15 16:18:03
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引用回帖:
2楼: Originally posted by wolfebst at 2011-08-15 16:18:03:
一般的试剂盒都应该能提出来。如果提不出来,可以反复冻容几次,或者液氮研磨

4楼2011-08-15 17:12:57
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zhymhbu

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

小嫩瓜(金币+1): 2011-08-16 08:49:36
超声破壁法。溶菌酶法。冻融法。有机溶剂溶解法等。
微生物学-发酵工程-生化工程-生化与分子生物学-环境毒理学
5楼2011-08-15 22:12:10
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