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如何建立酶切载体的质控
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落枫林
无虫
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专业: 免疫生物学
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]
如何建立酶切载体的质控
实验室有需求建立一个用于克隆构建的质粒载体酶切后的质量控制标准。类似于感受态的质控一样,酶切一批载体,然后检测其酶切效果、用于目的基因连接的效果等。不知道有没有人建过这样的质控标准,望不吝赐教!
首次发帖,不知道有没有说清楚。悬赏金币不多,但已经是全部家当了!
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1楼
2011-08-11 14:31:08
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blackrose8089
铁杆木虫
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jiayoubashaonian
4楼
2011-08-14 16:20:20
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西瓜
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专业: 细胞衰老
管辖:
分子生物
不了解这方面,帮顶
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2楼
2011-08-11 22:23:28
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xulili5283
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专业: 临床兽医学
【答案】应助回帖
我只知道体系不知道指控是什么。。。。
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3楼
2011-08-14 14:19:08
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空谷幽风
金虫
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性别: GG
专业: 生物大分子结构与功能
【答案】应助回帖
1949stone(MolEPI+1): 鼓励 学习 2011-08-17 12:33:01
落枫林(金币+5): 2011-08-17 14:17:46
1.在酶切前先质控质粒的质量,包括浓度,260/280,260/230的比值,看是否符合要求。
2.确定反应体系:包括质粒的用量和酶的用量及反应体积。
3.切完后如何回收:割胶or直接过柱
4.溶解酶切产物的体积
5.取规定的量(质量或体积)进行连转反应,最后通过菌落数和阳性率进行评价
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a?,c??ae~?a,EURc§?c?μé-,cs,,a‘?é?“i1/4?i1/4?i1/4?i1/4?
6楼
2011-08-17 12:20:28
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