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lixiaojing1318

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[交流] 荧光定量问题已有1人参与

为什么每次做阴性对照都有峰，CT值在30多，该怎么优化才能没有峰呢？
一般的阴性对照CT应该是在多少？

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1楼 2011-08-11 13:33:58

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西瓜

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首先可以更换实际，排除污染的问题，还有荧光染料的问题。
其次可能是引物二聚体，跑一个普通的琼脂糖凝胶电泳就知道了，引物二聚体跑在前面100bp左右的地方，且条带是模糊、弥散的一团。可以提高退火温度，适当减少引物的用量，或者重新设计引物来减少二聚体的情况。
一般阴性对照的Ct值大于35就算是正常的啦。

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