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lixiaojing1318

银虫 (小有名气)


[交流] 荧光定量问题 已有1人参与

为什么每次做阴性对照都有峰,CT值在30多,该怎么优化才能没有峰呢?
一般的阴性对照CT应该是在多少?
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西瓜

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小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖
首先可以更换实际,排除污染的问题,还有荧光染料的问题。
其次可能是引物二聚体,跑一个普通的琼脂糖凝胶电泳就知道了,引物二聚体跑在前面100bp左右的地方,且条带是模糊、弥散的一团。可以提高退火温度,适当减少引物的用量,或者重新设计引物来减少二聚体的情况。
一般阴性对照的Ct值大于35就算是正常的啦。
2楼2011-08-11 22:27:51
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