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twisty

木虫 (正式写手)

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[求助] SDS-page 分离胶不凝固

12.5%分离胶配制为:A:4.17mL
                                  B:   2.5mL
                                 H2O:3.3mL
                                AP:50微升
         TEMED:10微升
按比例加入电泳槽后,只有近50%凝固了,这是为什么?
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兼并碱基M=A/CR=A/GW=A/TS=G/CY=C/TK=G/TV=A/G/C&n...
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imfly77

木虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by yuandian114 at 2011-08-11 11:17:47:
1.可适当增加过硫酸铵和TEMED的用量
2.我配12.5%的胶是A:7.5ml   B:4.5 ml   水:6ml。过硫酸铵40ul  TEMED 10ul(我通常会多加,如过硫酸铵加80ul,TEMED加15ul)             配一面胶用量减半。
3.过硫酸铵 ...

过硫酸铵也不是必须先配现用。一次配10ml左右,用完拧紧放冰箱,一般能用几个月。但如果过硫酸铵出问题就会导致胶凝不了,以前我们实验室有一段时间就老出这问题,后来重新配了过硫酸铵就好了。
6楼2011-08-11 11:42:16
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silicare

荣誉版主 (文坛精英)

合伙创业版兼职版主

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): AP杯具概率大~~ 2011-08-11 10:41:18
先检查APS                                                    。
2楼2011-08-11 09:26:54
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mirror3895

铁杆木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


adslye(金币+1): 这是个化学反应,温度是会有影响,但主要还是试剂过期情况多点。感谢交流~ 2011-08-11 10:42:48
放在温度高一点的地方啊,据说这个胶凝固的速度和温度及氧气有关,氧气会抑制它凝固的
3楼2011-08-11 09:54:12
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imfly77

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
adslye(金币+2): 结合前面的AP,现在全了~祝顺利! 2011-08-11 10:41:47
可能的原因是过硫酸铵或TEMED失效。
建议重新配一下过硫酸铵。
4楼2011-08-11 09:56:12
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