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关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题
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虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。 现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题 1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个出芽的。有的皿里一个也不出。 2分化的比较的慢，大约1个月才会有芽点出现，芽点出来后吧，长成小苗的时间也比较久。 3关于农杆菌侵染时的最佳OD值，是0.5呢还是0.8.OD值应该反映的菌的生长时期吧，那侵染时是不是采用的对数期的菌，那时OD值是多少呢？ 4关于继代有文献称继代4次最好，有的则说可以去掉继代，各位又做转基因水稻的都继代几次啊？ |
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 实验技术、方法交流 | 宝贝里 |
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jhu132llh(金币+1): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:30
jhu132llh(金币+1): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:30
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谢谢，谢谢。我们实验室也是用的NB培养基，不过培养的时候比较的麻烦，先在NB2上培养，继代在NB0.5上，侵染前又转到了NB2上，2，和0.5指的是2,4-D的浓度是0.5,2mg/L,不过昨天我又看了篇文献说诱导和继代在光下培养有利于分化率的提高，不知道仁兄实验室是光培养还是暗培养，我之前一直用的是暗培，不知道是否对分化率产生了影响。还有关于温度，有的使用的是30度。这就属于高温了吧，先在看文献看的都搞不懂那些可信，那些不可信了。还有篇文献说农杆菌侵染做转基因水稻，40天就可得到转基因植株，不知道真假？   |
9楼2011-08-12 08:42:29
zqt123_1981
木虫 (小有名气)
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2楼2011-08-08 13:59:02
liling77ll
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3楼2011-08-09 16:02:54
4楼2011-08-10 13:28:12