应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题
51/1返回列表
查看: 5203  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

嫘诺

新虫 (小有名气)

[求助] 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题

虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个出芽的。有的皿里一个也不出。
2分化的比较的慢，大约1个月才会有芽点出现，芽点出来后吧，长成小苗的时间也比较久。
3关于农杆菌侵染时的最佳OD值，是0.5呢还是0.8.OD值应该反映的菌的生长时期吧，那侵染时是不是采用的对数期的菌，那时OD值是多少呢？
4关于继代有文献称继代4次最好，有的则说可以去掉继代，各位又做转基因水稻的都继代几次啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验技术、方法交流 宝贝里

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-06 18:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuaannie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:33:02
OD600=0.5左右，浸染时候愈伤的状态将会直接影响后面的分化，所以控制愈伤侵染时的状态非常重要。不知道你用什么筛选剂，HYG和G418分化率应该都还可以
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-10 13:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:32:37
引用回帖:
1楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-06 18:23:36:
虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个 ...

帮你顶一下，我觉得分化率低的话，介导过程出现转基因苗的机会也很低啊，能不能提高一下分化率。在考虑农杆菌介导。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-08 13:59:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liling77ll

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
嫘诺(金币+20): 5 2011-08-10 19:14:10
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:32:48
我们一般采用，OD600=0.5左右，应该是菌生长最多的时候，分化率本来就不高的，只要得到的是阳性苗，只有一株都是成功的，按照自己正确的实验方法去做就好
赞一下(1人) 回复此楼
做最好的自己，和自己的昨天对比
3楼2011-08-09 16:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

嫘诺

新虫 (小有名气)
★
jhu132llh(金币+1): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:16
引用回帖:
3楼: Originally posted by liling77ll at 2011-08-09 16:02:54:
我们一般采用，OD600=0.5左右，应该是菌生长最多的时候，分化率本来就不高的，只要得到的是阳性苗，只有一株都是成功的，按照自己正确的实验方法去做就好

非常感谢。实验方法是师姐留下来的方案，培养基配方啊，培养的过程，但是文献中报道的方法各有差异，比方说开始诱导愈伤时采用NB培养基，有的则用N6，分化培养基所加激素也不同，关键就是激素的比例，到底哪种比是最佳的。不知道仁兄实验室里采用的比较成熟的转化体系是是么样的？可否告知，万分感谢!!
赞一下(2人) 回复此楼
5楼2011-08-10 19:24:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料调剂 +4 爱擦汗的可乐冰 2026-02-28 4/200 2026-03-01 00:38 by 猫猫球alter
[考研] 307求调剂 +4 73372112 2026-02-28 6/300 2026-03-01 00:04 by ll247
[考研] 304求调剂 +3 52hz~~ 2026-02-28 5/250 2026-03-01 00:00 by 52hz~~
[考研] 272求调剂 +3 材紫有化 2026-02-28 3/150 2026-02-28 22:52 by ms629
[考研] 化工专硕348，一志愿985求调剂 +4 弗格个 2026-02-28 6/300 2026-02-28 22:00 by wang_dand
[考研] 295求调剂 +5 19171856320 2026-02-28 5/250 2026-02-28 21:39 by gaoxiaoniuma
[考研] 求调剂 +4 repeatt?t 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:16 by gaoxiaoniuma
[考研] 284求调剂 +4 天下熯 2026-02-28 4/200 2026-02-28 21:13 by gaoxiaoniuma
[考研] 高分子化学与物理调剂 +4 好好好1233 2026-02-28 7/350 2026-02-28 20:42 by 好好好1233
[考研] 085600材料工程一志愿中科大总分312求调剂 +8 吃宵夜1 2026-02-28 10/500 2026-02-28 20:27 by L135790
[考研] 298求调剂 +8 人间唯你是清欢 2026-02-28 11/550 2026-02-28 20:26 by L135790
[考研] 276求调剂 +3 路lyh123 2026-02-28 4/200 2026-02-28 19:45 by 路lyh123
[考研] 0856材料求调剂 +10 hyf hyf hyf 2026-02-28 11/550 2026-02-28 18:50 by 无际的草原
[教师之家] 版面费该交吗 +15 苹果在哪里 2026-02-22 18/900 2026-02-28 18:20 by mibaomingg
[考研] 285求调剂 +5 满头大汗的学生 2026-02-28 5/250 2026-02-28 18:10 by 材料专硕调剂；
[考博] 博士自荐 +3 kkluvs 2026-02-28 3/150 2026-02-28 16:59 by StarAura
[考研] 265分求调剂不调专业和学校有行学上就 +4 礼堂丁真258 2026-02-28 6/300 2026-02-28 16:18 by 求调剂zz
[考研] 304求调剂 +5 曼殊2266 2026-02-28 6/300 2026-02-28 12:44 by 迷糊CCPs
[考研] 272求调剂 +3 田智友 2026-02-28 3/150 2026-02-28 12:31 by 王加浩to
[硕博家园] 【博士招生】太原理工大学2026化工博士 +4 N1ce_try 2026-02-24 8/400 2026-02-26 08:40 by N1ce_try
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭