应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 专业学科区 » 转基因 » 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题
51/1返回列表
查看: 5874  |  回复: 17
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看
当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

嫘诺

新虫 (小有名气)

[求助] 关于用农杆菌侵染法获得转基因植物的几点问题

虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个出芽的。有的皿里一个也不出。
2分化的比较的慢，大约1个月才会有芽点出现，芽点出来后吧，长成小苗的时间也比较久。
3关于农杆菌侵染时的最佳OD值，是0.5呢还是0.8.OD值应该反映的菌的生长时期吧，那侵染时是不是采用的对数期的菌，那时OD值是多少呢？
4关于继代有文献称继代4次最好，有的则说可以去掉继代，各位又做转基因水稻的都继代几次啊？
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

实验技术、方法交流 宝贝里

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2011-08-06 18:23:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liling77ll

银虫 (小有名气)
★ ★ ★ ★ ★ ★
jhu132llh(金币+3): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:33:17
jhu132llh(金币+3): 鼓励积极参与讨论 2011-12-29 10:12:23
引用回帖:
5楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-10 19:24:47:
非常感谢。实验方法是师姐留下来的方案，培养基配方啊，培养的过程，但是文献中报道的方法各有差异，比方说开始诱导愈伤时采用NB培养基，有的则用N6，分化培养基所加激素也不同，关键就是激素的比例，到底哪种比 ...

我们实验室用的继代用的是NB，一般2次，其配方如下
NB培养基配方（基本培养基）
N6大量 B5微量 铁盐 肌醇 2,4-D ，B5-有机，其中有机中含有辅加物，倒培养基时抽滤加入，2,4-D一般2-3毫克每升
赞一下(2人) 回复此楼
做最好的自己，和自己的昨天对比
8楼2011-08-11 17:15:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答

zqt123_1981

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:32:37
引用回帖:
1楼: Originally posted by 嫘诺 at 2011-08-06 18:23:36:
虫友们，先遇到些难题，希望有懂得的给指点指点。现在这谢谢大家了。
现在我正在做转基因水稻，水稻品种为日本晴，实验过程中遇到了几点问题
1植株的分化率很低，具体没统计，不过一个皿里30-40块愈伤也就有3个 ...

帮你顶一下，我觉得分化率低的话，介导过程出现转基因苗的机会也很低啊，能不能提高一下分化率。在考虑农杆菌介导。
赞一下(1人) 回复此楼
2楼2011-08-08 13:59:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

liling77ll

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
嫘诺(金币+20): 5 2011-08-10 19:14:10
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:32:48
我们一般采用，OD600=0.5左右，应该是菌生长最多的时候，分化率本来就不高的，只要得到的是阳性苗，只有一株都是成功的，按照自己正确的实验方法去做就好
赞一下(1人) 回复此楼
做最好的自己，和自己的昨天对比
3楼2011-08-09 16:02:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

lihuaannie

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
jhu132llh(金币+2): 鼓励积极应助 2011-12-26 10:33:02
OD600=0.5左右，浸染时候愈伤的状态将会直接影响后面的分化，所以控制愈伤侵染时的状态非常重要。不知道你用什么筛选剂，HYG和G418分化率应该都还可以
赞一下(1人) 回复此楼
4楼2011-08-10 13:28:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
查看全部 18 个回答
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 2026年的国家社科基金项目通讯评审的新规则与新动向、新挑战 +3 process2012 2026-08-23 4/200 2026-08-23 12:54 by huixian257
[基金申请] 什么时候开奖？ +9 CrisMessi 2026-08-18 10/500 2026-08-23 12:03 by 丶昵称占用
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[基金申请] 今天放榜吗？ +15 布布和一二 2026-08-19 16/800 2026-08-23 09:55 by 张春生
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:55 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 5/250 2026-08-23 03:52 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 6/300 2026-08-23 03:40 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章，我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +4 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 11/550 2026-08-23 02:55 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +3 zjuhero 2026-08-22 4/200 2026-08-22 20:02 by mycsru
[教师之家] 售一区SCI文章T0P，我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗？20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天系统多次维护，明天很可能放榜！ +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭