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original900

木虫 (小有名气)


[交流] 如何判断克隆到的基因是否是新基因呢?

各位好! 弱弱的请教下大家,我的测序结果在NCBI上直接比对后显示“No significant similarity found”,这说明什么问题?说明克隆到的基因是新基因,还是在比对过程中有什么问题?谢谢!
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)


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original900(金币+1):谢谢参与
original900(金币+10): 谢谢 2011-08-04 08:32:08
dhd997(金币+5, MolEPI+1): 加油啊 2011-08-04 09:12:59
引用回帖:
1楼: Originally posted by original900 at 2011-08-03 23:20:30:
各位好! 弱弱的请教下大家,我的测序结果在NCBI上直接比对后显示“No significant similarity found”,这说明什么问题?说明克隆到的基因是新基因,还是在比对过程中有什么问题?谢谢!
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这个不能说明你克隆到的基因是新基因。

1)在NCBI中进行核苷酸序列比对Blast n,如果选择"Highly similar sequences (megablast) "的话,比对经常会显示“No significant similarity found”,我在比对的时候经常发现我的序列和其他序列同源性(相似性)大于50%都会出现这样的情况,我感觉以前好像没有这样,但不知道具体的原因。这个时候你可以选择比对参数“Somewhat similar sequences (blastn) ”,一般就不会再显示“No significant similarity found”。

2)其次你可以利用DNAman等软件找出序列的编码框,并把序列翻译成氨基酸,然后再利用氨基酸序列进行比对(protein blast, Blast p),一般也不会出现“No significant similarity found”,除非你的序列真的是新基因序列。

3)再次,要考虑你的序列会不会存在测序或扩增的误差。一般如果要判断你的基因是新基因的话,相似性可能要低于20%。也许还有其他方面的标准!

祝好运!

[ Last edited by jinkui960 on 2011-8-4 at 00:43 ]
2楼2011-08-04 00:42:07
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2017-01-22 10:00   回复  
original900(金币+1): 谢谢参与
。 发自小木虫Android客户端
2017-01-22 10:31   回复  
original900(金币+1): 谢谢参与
祝福! 发自小木虫Android客户端
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