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taiyang0209

银虫 (小有名气)

[求助] 【求助】微生物转化的问题

最近做微生物转化,每一步都是按实验规程做的,可是以点板的时候就是看不到metabolite, 实在找不到原因在哪,麻烦大家帮帮忙,给点建议,应该注意些什么。帮忙找下可能的原因。微生物这方面实在是新手,没怎么做过。谢谢大家。
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
dhd997(金币+3): 最近很活跃 2011-08-02 08:09:40
taiyang0209(金币+4): 谢谢 2011-08-03 12:35:29
引用回帖:
1楼: Originally posted by taiyang0209 at 2011-08-01 20:54:27:
最近做微生物转化,每一步都是按实验规程做的,可是以点板的时候就是看不到metabolite, 实在找不到原因在哪,麻烦大家帮帮忙,给点建议,应该注意些什么。帮忙找下可能的原因。微生物这方面实在是新手,没怎么做过 ...

微生物的培养条件和metabolite的产生密切相关,有时候细微的变化会导致metabolite的产生量发生明显的变化,培养条件包括:培养基的组成、培养温度、PH条件和摇床的速度等,这些培养条件的不一致都会影响生物转化。但理论上来说,生物转化一般不会对条件那么敏感,除非本来的转化效率不高,产生的metabolite很少。

你所说的“每一步都是按实验规程做的”,是参考别人的实验条件吗?你的点板条件是否适于检测你的metabolite呢?
2楼2011-08-01 22:25:49
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-01 22:25:49:
微生物的培养条件和metabolite的产生密切相关,有时候细微的变化会导致metabolite的产生量发生明显的变化,培养条件包括:培养基的组成、培养温度、PH条件和摇床的速度等,这些培养条件的不一致都会影响生物转化 ...

是的,是按我们实验室之前的条件做的。可是就是找不到metabolite,点板的条件要怎么选择呢,因为转化后的东西不知道极性大小,只能慢慢试吗?谢谢
3楼2011-08-02 08:33:21
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jinkui960

至尊木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

taiyang0209(金币+1): 求建议和技巧啊 2011-08-04 09:11:51
引用回帖:
3楼: Originally posted by taiyang0209 at 2011-08-02 08:33:21:
是的,是按我们实验室之前的条件做的。可是就是找不到metabolite,点板的条件要怎么选择呢,因为转化后的东西不知道极性大小,只能慢慢试吗?谢谢

微生物培养有时候可能存在一些技巧,最好能找你们实验室做过这个实验的师兄师姐具体请教一下,可能对你的帮助会更大!

祝好运!
4楼2011-08-03 12:38:32
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by jinkui960 at 2011-08-03 12:38:32:
微生物培养有时候可能存在一些技巧,最好能找你们实验室做过这个实验的师兄师姐具体请教一下,可能对你的帮助会更大!

祝好运!

可是现在找不到做过的师兄师姐啊。。。
5楼2011-08-04 09:05:27
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

求建议和技巧啊
6楼2011-08-04 09:10:53
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长鑫

木虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-04 16:37:33
引用回帖:
1楼: Originally posted by taiyang0209 at 2011-08-01 20:54:27:
最近做微生物转化,每一步都是按实验规程做的,可是以点板的时候就是看不到metabolite, 实在找不到原因在哪,麻烦大家帮帮忙,给点建议,应该注意些什么。帮忙找下可能的原因。微生物这方面实在是新手,没怎么做过 ...

转化条件需要摸索,同时可能存在的问题是这个菌种不能对该底物进行转化,如果你很确定自己的菌株可以进行转化,那也有可能是在你进行保藏的时候菌种出现了问题。

» 本帖已获得的红花(最新10朵)

7楼2011-08-04 09:55:14
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taiyang0209

银虫 (小有名气)

送鲜花一朵
引用回帖:
7楼: Originally posted by 长鑫 at 2011-08-04 09:55:14:
转化条件需要摸索,同时可能存在的问题是这个菌种不能对该底物进行转化,如果你很确定自己的菌株可以进行转化,那也有可能是在你进行保藏的时候菌种出现了问题。

谢谢,请问怎么才能确定这个菌种能不能对底物进行转化呢?!
8楼2011-08-04 10:28:37
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长鑫

木虫 (正式写手)

★ ★
dhd997(金币+2): good 2011-08-04 16:37:48
引用回帖:
8楼: Originally posted by taiyang0209 at 2011-08-04 10:28:37:
谢谢,请问怎么才能确定这个菌种能不能对底物进行转化呢?!

方法很简单,通过对发酵液中的底物成分进行粗提取,粗提取所使用的萃取剂需要进行摸索,需要尝试多种有机溶剂,然后进行TLC点板紫外观察,底物和发酵液都需要点板,然后进行观察,如果出现了新的点,就可以初步认定可以进行,但是是不是转化出来的结果是非常有意义,还需要对该物质进行分离后鉴定。
9楼2011-08-04 15:04:38
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